Cytiva, BR100034, Chip sensor NTA

Chip sensor NTA, paquete de 3 El chip sensor Biacore NTA captura moléculas marcadas con histidina mediante quelación de metales para el posterior análisis de la interacción por resonancia de plasmón superficial (SPR). • Versátil: captura muchos tipos de moléculas marcadas con histidina • Listo para usar: NTA está preinmovilizado, listo para la carga de níquel y la captura de ligando • Conveniente: el kit de reactivos NTA compatible proporciona soluciones de iones de níquel y regeneración • Fácilmente regenerado: la inyección de EDTA elimina eficazmente los iones metálicos para regenerar el sensor • Captura de quelación: desarrollo de ensayos más sencillos, potencial para estandarizar la orientación del objetivo Captura estable de proteínas recombinantes marcadas con histidina. La histidina es la etiqueta molecular más utilizada en la actualidad. Sensor Chip NTA permite capturar diversos tipos de proteínas marcadas con polihistidina para posteriores ensayos SPR. Permite estudiar la interacción de proteínas inmovilizadas con una amplia gama de moléculas de analito, desde compuestos de bajo peso molecular hasta proteínas de gran tamaño. Para experimentos que estudian analitos de bajo peso molecular, Sensor Chip NTA es la mejor opción. Cómo funciona la captura por quelación de NTA con el chip sensor de Biacore El chip sensor NTA consiste en dextrano carboximetilado con ácido nitrilotriacético (NTA) inmovilizado covalentemente. La molécula de NTA quela iones metálicos como el níquel (Ni 2+ ), creando sitios de coordinación que se unen a las etiquetas de polihistidina en proteínas recombinantes y otras biomoléculas. Ventajas de las técnicas de captura frente a las de inmovilización covalente La captura no covalente de ligandos, por ejemplo mediante quelación de iones metálicos, tiene varias ventajas sobre la inmovilización covalente. Las proteínas etiquetadas se pueden capturar directamente de extractos celulares crudos o de medio de cultivo, lo que requiere poca o ninguna preparación de la muestra. Dado que se captura ligando nuevo en cada ciclo, se puede utilizar la misma superficie del chip para interacciones de análisis que involucran diferentes ligandos. Las condiciones de regeneración son genéricas y, por lo tanto, se minimiza la necesidad de desarrollo de ensayos. Además, la captura genera una orientación estructural dirigida de la proteína en la superficie, lo que potencialmente ofrece una exposición óptima del sitio. Sensor Chip NTA para el descubrimiento de fármacos basado en fragmentos (FBDD) La necesidad de tecnologías para detectar y perfilar de forma fiable las interacciones que involucran compuestos muy pequeños está aumentando en áreas como el descubrimiento de fármacos basado en fragmentos (FBDD). Las mejoras en la sensibilidad del instrumento SPR han allanado el camino para la aplicación de métodos de captura de quelación en FBDD. Cuando se utiliza Sensor Chip NTA para FBDD, la proteína diana se puede eliminar fácilmente de la superficie del chip utilizando un pulso de EDTA. De esta manera, la proteína diana siempre está fresca y no se descompondrá. Los investigadores del laboratorio SGC Karolinska utilizaron Sensor Chip NTA para la detección de inhibidores de PARP1 como parte de un exitoso programa de FBDD en el desarrollo de fármacos contra el cáncer. En ensayos realizados utilizando Biacore T200, el grupo pudo diferenciar posibles inhibidores de proteínas diana en función de sus perfiles de interacción a pesar de la unión a sitios activos muy similares. Además, los investigadores descubrieron que Sensor Chip NTA tenía la ventaja de permitir controlar y estandarizar la orientación de la proteína diana inmovilizada. Formatos de chips de sensor para sistemas Biacore. Los chips de sensor Biacore están disponibles en dos formatos: los chips de sensor de la serie S se utilizan con los sistemas SPR Biacore serie 1, serie 8, Biacore T200, Biacore S200 y Biacore 4000. Los chips de sensor no designados con la serie S están diseñados para los sistemas SPR Biacore X100 y Biacore C.