Merck, 11745816910, mezcla de traducción DIG-Nick

DIG-Nick Translation Mix es una práctica mezcla de enzimas y nucleótidos para la traducción de mellas. Utiliza una combinación de ADNasa y ADN polimerasa para mellar una hebra de la hélice de ADN, incorporando nucleótidos marcados a medida que la polimerasa examina o corrige el sitio mellado. Con este método se utilizan habitualmente plásmidos grandes, cósmidos y fragmentos de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), y el ADN puede linealizarse o superenrollarse. Las plantillas individuales producen resultados consistentes en la reacción estándar de 90 minutos y dan como resultado una longitud promedio de sonda de 200 pb a 500 pb. La relación molar de digoxigenina (DIG)-11-desoxiuridina trifosfato (dUTP) a desoxitimidina trifosfato (dTTP) se ajusta para garantizar que cada 20 a 25 nucleótidos del ADN recién sintetizado se modifique con DIG. Esta densidad de haptenos en el ADN produce la mayor sensibilidad en la reacción de detección inmunológica.