Merck, 575656-U, HybridSPE®-Fosfolípido

La tecnología HybridSPE-Phospholipid es una plataforma de preparación de muestras sencilla y genérica, diseñada para la eliminación a gran escala de interferencias endógenas de proteínas y fosfolípidos del plasma y suero biológicos antes del análisis por LC-MS o LC-MS/MS. El plasma o suero biológico se somete primero a una precipitación proteica mediante la adición y mezcla de acetonitrilo acidificado. Las proteínas precipitadas se eliminan posteriormente por centrifugación y el sobrenadante resultante se carga en la placa o cartucho HybridSPE-Phospholipid de 96 pocillos, que actúa como un filtro químico específico para la eliminación de fosfolípidos endógenos de la muestra. El mecanismo de retención de fosfolípidos se basa en una interacción ácido-base de Lewis altamente selectiva entre los iones de zirconio patentados, unidos funcionalmente a la fase estacionaria HybridSPE-Phospholipid, y la fracción de fosfato, compatible con todos los fosfolípidos. El eluyente resultante está listo para el análisis inmediato por LC-MS o LC-MS-MS. Los métodos de precipitación en pocillo y en cartucho están disponibles para la versión HybridSPE-Phospholipid de 96 pocillos y el cartucho HybridSPE-Phospholipid Ultra. En estos métodos, primero se añade plasma/suero biológico al pocillo o al cartucho, seguido de acetonitrilo acidificado (agente de precipitación). Tras una breve agitación con vórtex, se aplica vacío. Dado que las versiones de 96 pocillos y el cartucho Ultra contienen una serie de filtros/fritas hidrófobas de baja porosidad, el conjunto de filtro/frita de lecho empacado actúa como un filtro de profundidad que facilita la eliminación simultánea de fosfolípidos y proteínas precipitadas durante el proceso de extracción. Los cartuchos HybridSPE-Phospholipid estándar requieren un método de precipitación fuera de línea.