Merck, 5893801001, resina de purificación cOmplete™ His-Tag

Tamaño de perla: 45 a 165 μM Capacidad de unión: ≥ 40 mg de proteína por ml de volumen de lecho de resina. La capacidad de unión de la resina a varios tipos de proteínas puede variar según las características de la proteína, como el tamaño de la proteína. Las columnas de purificación cOmplete His-Tag se unen con una alta especificidad a la proteína marcada con polihistidina. Como consecuencia, la cinética de unión puede parecer diferente en comparación con las matrices de quelatos metálicos convencionales. La capacidad completa de las columnas de purificación cOmplete His-Tag se puede lograr permitiendo más tiempo para que la proteína se una a la resina mediante la reducción del caudal durante el procedimiento de purificación por cromatografía. Caudal lineal máximo: 1420 cm/hora Caudal volumétrico recomendado: El caudal volumétrico es una función de la sección transversal de la columna. Usando la siguiente fórmula, un caudal lineal puede convertirse en un caudal volumétrico (mL/min.): Caudal lineal (cm/hora) × área de la sección transversal de la columna (cm²)/60. El área de la sección transversal de la columna se define como Π × r², donde Π es la constante pi y r es el radio interno de la columna. Concentración recomendada de imidazol para carga/lavado: La unión no específica de proteínas sin una etiqueta His es baja. Use hasta 5 mM de imidazol en los tampones de carga y/o lavado. Si establece un nuevo ensayo para la purificación de proteínas His-tag con columnas de purificación cOmplete His-Tag, no use imidazol. Si, p. ej., la pureza de la proteína His-tag necesita mejorarse después de este primer paso, use imidazol en una concentración final de hasta 5 mM en un segundo paso. Concentración recomendada de imidazol para la elución: Hasta 500 mM. Nota: A diferencia de otras resinas disponibles, la proteína con etiqueta His unida suele eluirse de las columnas de purificación completas con etiqueta His con una concentración de imidazol menor, por ejemplo, de 25 a 45 mM. Compatibilidad para almacenamiento a largo plazo: 20 % de etanol, pH de 4,0 a 9,0. Compatibilidad durante la cromatografía: La resina es compatible con 10 mM de EDTA, 10 mM de DTT durante la purificación (incubación de 1 hora), 6 M de clorhidrato de guanidinio, 8 M de urea, pH de 2,0 a 14,0. Compatibilidad durante la limpieza: 4 % de SDS.