Merck, 71205-3CN, Benzonase® Nuclease HC, Pureza > 90%

Benzonase® Nuclease es una endonucleasa genéticamente modificada de Serratia marcescens. Degrada todas las formas de ADN y ARN (monocatenario, bicatenario, lineal y circular) sin actividad proteolítica. Es eficaz en una amplia gama de condiciones y posee una actividad específica excepcionalmente alta. La enzima digiere completamente los ácidos nucleicos a oligonucleótidos con terminación 5'-monofosfato de 2 a 5 bases de longitud (por debajo del límite de hibridación), lo cual es ideal para la eliminación de ácidos nucleicos de proteínas recombinantes, lo que permite cumplir con las directrices de la FDA sobre contaminación por ácidos nucleicos. La capacidad de Benzonase para hidrolizar rápidamente los ácidos nucleicos la convierte en una excelente opción para la reducción de la viscosidad, lo que reduce el tiempo de procesamiento y aumenta la producción de proteínas. Por ejemplo, la enzima es compatible con los reactivos de extracción de proteínas BugBuster® y PopCulture® y, por lo tanto, puede añadirse junto con estos reactivos para eliminar la viscosidad y los ácidos nucleicos de los extractos de E. coli. La enzima consta de dos subunidades de 30 kDa cada una. Es funcional entre pH 6 y 10 y de 0-42 °C y requiere 1-2 mM de Mg²⁺ para su activación. La enzima también es activa en presencia de detergentes iónicos y no iónicos, agentes reductores, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) y urea (la actividad relativa depende de las condiciones específicas). La actividad se inhibe por > 150 mM de cationes monovalentes, > 100 mM de fosfato, > 100 mM de sulfato de amonio o > 100 mM de guanidina HCl. Benzonase Nuclease está disponible en grados ultrapuros (> 99% por SDS-PAGE) y puros (> 90%) a una concentración estándar de 25-29 U/μl y a una alta concentración (HC) de 250 U/μl. Ambas preparaciones están libres de proteasa detectable y tienen una actividad específica > 1 × 10⁶ U/mg de proteína. El grado de pureza > 99% se analiza para detectar endotoxinas y contiene < 0,25 UE/1000 unidades. El producto se suministra como solución filtrada de 0,2 μm en glicerol al 50%. Conservar a -20 °C. Endotoxina total: 90% mediante SDS-PAGE.