Merck, 71206-3CN, Benzonase® Nuclease HC, Pureza > 99%

Benzonase® Nuclease es una endonucleasa genéticamente modificada de Serratia marcescens. Degrada todas las formas de ADN y ARN (monocatenario, bicatenario, lineal y circular) sin actividad proteolítica. Es eficaz en una amplia gama de condiciones y posee una actividad específica excepcionalmente alta. La enzima digiere completamente los ácidos nucleicos a oligonucleótidos con terminación 5'-monofosfato de 2 a 5 bases (por debajo del límite de hibridación), lo cual es ideal para la eliminación de ácidos nucleicos de proteínas recombinantes, lo que permite cumplir con las directrices de la FDA sobre contaminación por ácidos nucleicos. La capacidad de Benzonase para hidrolizar rápidamente los ácidos nucleicos la convierte en una excelente opción para la reducción de la viscosidad, reduciendo el tiempo de procesamiento y aumentando la producción de proteínas. Por ejemplo, la enzima es compatible con los reactivos de extracción de proteínas BugBuster y PopCulture, por lo que puede añadirse junto con estos reactivos para eliminar la viscosidad y los ácidos nucleicos de los extractos de E. coli. La enzima consta de dos subunidades de 30 kDa cada una. Funciona a pH 6-10 y de 0 a 42 °C, y requiere de 1 a 2 mM de Mg²⁺ para su activación. También es activa en presencia de detergentes iónicos y no iónicos, agentes reductores, PMSF (1 mM), EDTA (1 mM) y urea (la actividad relativa depende de las condiciones específicas). La actividad se ve inhibida por cationes monovalentes >150 mM, fosfato >100 mM, sulfato de amonio >100 mM o clorhidrato de guanidina >100 mM. La Benzonasa Nucleasa está disponible en grados ultrapuros (>99 % por SDS-PAGE) y puros (>90 %) a una concentración estándar de 25-29 U/µl y a una concentración alta (HC) de 250 U/µl. Ambas preparaciones están libres de proteasa detectable y presentan una actividad específica > 1 × 10⁶ U/mg de proteína. El grado de pureza > 99% se analiza para endotoxinas y contiene < 0,25 UE/1000 unidades. El producto se presenta como una solución filtrada de 0,2 µm en glicerol al 50%. Conservar a -20 °C. Endotoxina total: < 0,25 UE/1000 unidades. Pureza: > 99% mediante SDS-PAGE.