Merck, ES001-500ML, reactivo único TMB/E, color azul, sustrato de peroxidasa de rábano picante (soluble)

Se ha demostrado que la TMB (3,3′,5,5′-tetrametilbencidina) es un sustrato seguro y sensible para el análisis de HRP. Inicialmente, en presencia de HRP y peróxido de hidrógeno, se forma un producto de oxidación de un electrón. Este compuesto, un radical libre catiónico, es de color azul con un máximo de adsorción de 653 nm. La reacción posterior con HRP/H₂O₂ o la acidificación del radical con ácido produce el producto de oxidación terminal de diimina, que adsorbe luz a 450 nm. El coeficiente de extinción del radical (E₁653 nm = 3,9 x 10⁻¹ mol⁻¹ cm⁻¹) y la diimina (E₁450 nm = 5,9 x 10⁻¹ mol⁻¹ cm⁻¹) proporcionan un sistema excepcionalmente sensible para el análisis de HRP y sondas marcadas con HRP. ES001 es un reactivo monocomponente estable a temperatura ambiente e insensible a la luz normal de laboratorio. Está optimizado con respecto a las concentraciones de TMB y peróxido de hidrógeno y produce una respuesta lineal con las concentraciones de HRP habitualmente empleadas en ensayos inmunológicos.