Merck, F9252-500ML, reactivo de fenol de Folin & Ciocalteu

El reactivo de fenol de Folin & Ciocalteu se utiliza con mayor frecuencia en el método de Lowry para determinar la concentración de proteínas. También se ha empleado para la cuantificación de fenólicos totales. En este método, la proteína se pretrata con cobre(II) en un reactivo de biuret modificado (solución alcalina de cobre estabilizada con tartrato de sodio y potasio). La adición del reactivo de fenol genera cromógenos que producen una absorbancia creciente entre 550 y 750 nm. Normalmente, la absorbancia en el pico (750 nm) o en el hombro (660 nm) se utiliza para cuantificar concentraciones de proteína entre 1 y 100 mg/ml, mientras que la absorbancia a 550 nm se utiliza para cuantificar concentraciones de proteína más altas. En ausencia de cobre, la intensidad del color se determina principalmente por el contenido de tirosina y triptófano de la proteína, y en menor medida por la cisteína y la histidina. El cobre (II) no afecta la formación de color por la tirosina, el triptófano ni la histidina, pero la reduce debido a la cisteína. Se han publicado numerosas modificaciones del procedimiento de ensayo original, incluyendo métodos para mejorar el desarrollo del color, determinar el contenido de proteínas insolubles y automatizar el procedimiento. Compuestos como numerosos tampones, agentes quelantes, detergentes y compuestos orgánicos cíclicos pueden interferir con el ensayo de proteínas de Lowry. El reactivo de fenol de Folin & Ciocalteu también puede utilizarse como reactivo de pulverización en procedimientos cromatográficos.