Merck, MAK150-1KT, Kit de ensayo de pH intracelular fluorométrico

Los cambios de pH intracelular están implicados en diversos procesos fisiológicos y patológicos, como la proliferación celular, la apoptosis, la fertilización, las neoplasias malignas, la resistencia a múltiples fármacos, el transporte iónico, los trastornos de almacenamiento lisosomal y la enfermedad de Alzheimer. Este kit puede utilizarse para medir la disminución del pH intracelular en células tratadas en diversas condiciones mediante un protocolo estándar sencillo. Como alternativa, se puede utilizar un procedimiento de carga ácida para medir el aumento del pH intracelular asociado a cambios en el metabolismo celular debido a la activación de GPCR, la actividad de factores de crecimiento u otra estimulación celular. En el procedimiento de carga ácida, se añade una solución de cloruro de amonio después de cargar el colorante fluorescente de pH en las células en un volumen mínimo. A este paso de carga ácida le sigue la adición del agonista en un volumen relativamente grande (~4x) de tampón. El cambio repentino de volumen inicia un eflujo de amoníaco (NH₃) de las células, lo que provoca una rápida disminución del pH intracelular y, por consiguiente, una disminución de la señal de fluorescencia. El efecto del agonista sobre la recuperación posterior del pH intracelular se mide mediante el aumento relativo de la señal de fluorescencia.