Merck, MRN70-1KT, kit de minipreparación de ARNm GenElute™

Procedimientos como la síntesis de ADNc, la determinación de perfiles de expresión y otros requieren la separación del ARNm del ARNr y ARNt, mucho más abundantes. Los kits de ARNm GenElute proporcionan procedimientos prácticos para aislar el ARNm poliadenilado del ARN total previamente preparado o directamente de células y tejidos de mamíferos. Para la preparación directa del ARNm, las células o tejidos se disgregan mediante digestión con SDS/proteinasa K para liberar el ARN y eliminar las ARNasas. Ambos tipos de kits utilizan oligo dT30 unido covalentemente a microesferas de poliestireno de 1 μm para capturar el ARNm poliadenilado por hibridación. Las microesferas de poliestireno permanecen suspendidas durante la hibridación, eliminando la necesidad de mezclar o agitar, como es habitual con la celulosa o las partículas magnéticas. También se eligió el poliestireno porque las microesferas de poliestireno oligo(dT) producen un ARNm más limpio con menos lavados rigurosos que la celulosa oligo(dT) más comúnmente utilizada (2 o 3 lavados frente a 10 o más). Con los kits GenElute, los complejos de ARNm-perlas se lavan en un filtro de centrifugación de microcentrífuga y se eluyen en Tris-HCl 10 mM, pH 7,5. El ARNm preparado con cualquiera de los kits es adecuado para una variedad de aplicaciones posteriores, como transferencia Northern, hibridaciones de matrices de expresión o chips y síntesis de ADNc y construcción de bibliotecas.