Merck, PLED35-1KT, GenElute™ Kit de plásmido midiprep sin endotoxinas

El kit de plásmidos sin endotoxinas GenElute ofrece un método sencillo, rápido y rentable para purificar ADN plasmídico con ≤0,1 UE/μg de ADN para una transfección de alta eficiencia. Las endotoxinas (también conocidas como lipopolisacáridos o LPS) suelen copurificarse con ADN plasmídico y reducen significativamente la eficiencia de la transfección en líneas celulares sensibles a las endotoxinas. La E. coli recombinante se extrae de un cultivo de una noche mediante centrifugación y se somete a un procedimiento de lisis alcalina-SDS modificado para producir un lisado clarificado. Las endotoxinas se eliminan del lisado clarificado mediante sencillos pasos de separación por extracción. El ADN plasmídico se purifica aún más mediante adsorción en sílice en presencia de sales. Tras un sencillo paso de centrifugado y lavado, el ADN plasmídico unido se eluye en agua sin endotoxinas. Se pueden preparar hasta 250 μg de ADN plasmídico sin endotoxinas a partir de 5 a 40 mL de cultivo. El ADN plasmídico recuperado se encuentra predominantemente en su forma superenrollada. Está listo para su uso inmediato en aplicaciones posteriores, como transfección, digestión por restricción, clonación, secuenciación y amplificación por PCR.