Merck, S7165, Kit de detección de apoptosis in situ ApopTag Red

El kit de detección de apoptosis in situ ApopTag Red detecta la apoptosis in situ mediante el método TUNEL indirecto, utilizando un anticuerpo antidigoxigenina con un fluorocromo de rodamina. El kit proporciona tinción de inmunofluorescencia indirecta para 40 muestras. Los resultados se analizan mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo (requiere un láser especial y filtros para rodamina). Los kits ApopTag indirectos (S7100, S7101, S7110, S7111 y S7165) han sido aprobados para su uso en la tinción histoquímica y citoquímica de las siguientes muestras: tejidos fijados con formalina e incluidos en parafina, secciones criostáticas, suspensiones celulares, citocentrifugados y cultivos celulares. Se han desarrollado métodos de montaje completo (34, 45). La especificidad de tinción de los kits ApopTag Peroxidasa ha sido demostrada por Chemicon y muchos otros laboratorios. Chemicon ha probado muchos tipos de sistemas de células y tejidos modelo, incluyendo: (a) próstata, timo e intestino grueso humanos (datos internos); (b) próstata ventral de rata postcastración (21), (c) linfocitos de timo de rata tratados in vitro con dexametasona (3, 13), (d) extremidades de embriones de ratón de 14 días (1) y (e) glándula mamaria de rata en regresión tras el destete (36). En los modelos de timocitos y próstata, se utilizó electroforesis en gel de agarosa para evaluar la cantidad de ADN en escalera, que alcanzó su punto máximo coincidiendo con el porcentaje máximo de células teñidas. Numerosas publicaciones en revistas científicas de laboratorios de todo el mundo han establecido la utilidad de los kits ApopTag. (Véase Sec. V. Referencias, Publicaciones que citan los kits ApopTag). Los kits ApopTag de fluoresceína y rodamina se han probado para la tinción específica en estos sistemas modelo: (a) linfocitos humanos normales de sangre periférica inducidos con dexametasona, teñidos en citocentrifugación; (b) glándula mamaria de rata en regresión, teñidos en secciones fijadas con formalina e incluidas en parafina; y (c) linfocitos humanos leucémicos de sangre periférica inducidos con camptotecina, teñidos en suspensiones celulares y utilizados para citometría de flujo cuantitativa (22). En algunos casos, ciertos tejidos contienen tipos celulares que se unen a cualquier nucleótido marcado con fluoresceína, como el del kit ApopTag Fluorescein Direct (S7160). Por lo tanto, se recomienda utilizar este kit (S7160) para teñir suspensiones celulares, citocentrifugación y cultivos celulares, pero no secciones de tejido. Chemicon recomienda el uso de los kits de fluoresceína ApopTag (S7110, S7111) o el kit ApopTag Red para la tinción de cortes de tejido. Consulte la ficha técnica para obtener referencias.