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BRAND / VENDOR: New England Biolabs

New England Biolabs, B0570S, tampón de reacción DNasa I-XT

CATALOG NUMBER: B0570S
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Product Description
Categorías relacionadas Exonucleasas y endonucleasas no específicas,, Especificación de tampones Componentes del tampón 1X Tris-HCl 10 mM NaCl 50 mM MgCl2 10 mM CaCl2 0,5 mM Tween® 20 al 0,005 % pH 7,6 a 25 °C Preguntas frecuentes P: ¿Cuál es la diferencia entre la ADNasa I (NEB n.º M0303) y la ADNasa I-XT (NEB n.º M0570)? R: La ADNasa I se inhibe con concentraciones de sal >50 mM. La ADNasa I-XT es una ADNasa I tolerante a la sal que retiene la actividad hasta 300 mM de sal, pero tiene una actividad óptima a concentraciones de sal entre 50 y 100 mM. Por lo tanto, la ADNasa I-XT es la enzima preferida para la eliminación de la plantilla de ADN de una reacción de transcripción in vitro (IVT). P: ¿Funcionará la DNasa I-XT (NEB n.° M0570) en los tampones NEB 1-4? R: Sí, pero no con la misma eficacia que en el tampón de reacción DNasa I-XT (NEB n.° B0570). La DNasa I-XT es una enzima dependiente del calcio que funciona mejor en el tampón de reacción DNasa I-XT, que contiene cloruro de calcio. Se recomienda que, incluso si utiliza los tampones NEB 1-4, añada tampón DNasa I-XT o 0,5 mM de CaCl₂ a la reacción. P: ¿Cuál es la mejor manera de eliminar la DNasa I-XT de la reacción? R: La mejor manera de eliminar la DNasa I-XT de la reacción es realizar una extracción con fenol/cloroformo o utilizar una columna de centrifugación. No se recomienda la inactivación por calor, ya que podría no inactivar completamente la DNasa I-XT y podría interferir con las aplicaciones posteriores. P: ¿Funcionará la DNasa I-XT en el tampón rCutSmart? R: Sí, la DNasa I-XT funcionará en el tampón rCutSmart, con la adición de calcio (0,5 mM CaCl₂). Para ver su porcentaje de actividad funcional en rCutSmart y el de otras enzimas modificadoras de ADN en el proceso de clonación, consulte la tabla de actividad de las enzimas modificadoras de ADN en el tampón rCutSmart™. P: ¿Puedo usar el kit de limpieza de ARN Monarch® (NEB n.° T2030, T2040, T2050) para limpiar mi ARN tratado con DNasa I-XT (NEB n.° M0570)? R: Sí, los kits de limpieza de ARN Monarch eliminarán la actividad residual de la DNasa I-XT de las muestras de ARN. El tratamiento en columna con DNasa I/DNasa I-XT a menudo puede generar actividad residual de DNasa I, por lo tanto, no recomendamos el tratamiento en columna con DNasa I/DNasa I-XT con el kit de limpieza de ARN Monarch, sino el tratamiento en solución con DNasa I/DNasa I-XT antes de la limpieza del ARN.

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