New England Biolabs, B7703S, colorante de carga de proteína azul

El colorante de carga de proteínas azul contiene un vial de tampón de carga azul y un vial de agente reductor 30X. La solución combinada es ideal para aplicaciones de gel de proteínas. Categorías relacionadas Herramientas para proteínas Tampones y diluyentes, Tampones de carga de gel, Estándares de proteínas, Preguntas frecuentes P: ¿Qué se suministra con el paquete de tampón de carga azul? R: El paquete contiene 8 ml de tampón de carga azul 3X y 1 ml de DTT 30X (1,25 M). P: ¿Cuál es la composición del tampón de carga azul? R: Tampón de carga azul 1X: 62,5 mM Tris-HCl (pH 6,8 a 25 °C), 2 % (p/v) SDS, 10 % glicerol y 0,01 % (p/v) azul de bromofenol. P: ¿Cómo se debe utilizar el tampón de carga azul? A: 1. Agregue 1/10 del volumen de la solución 30X DTT a 1 volumen de tampón de carga azul 3X. 2. Agregue 1/2 volumen de la mezcla anterior a la muestra de proteína. 3. Caliente a 100 °C durante 5 minutos para desnaturalizar la proteína. 4. Centrifugue durante 30 segundos en una microcentrífuga para eliminar el material precipitado. 5. Cargue en gel. P: ¿Cuál es la diferencia entre los tampones de carga rojo y azul? R: La única diferencia es el colorante. Se eligió el rojo para los marcadores preteñidos porque el colorante azul puede confundirse con una banda de proteína adicional. P: ¿Cuáles son las funciones de los componentes del paquete de tampón? R: El DTT está presente para ayudar a reducir cualquier enlace disulfuro SS que ayude a formar la estructura secundaria/terciaria y/o la formación de dímeros. El detergente SDS se une a las cargas positivas de las proteínas para que las proteínas se separen en función del tamaño y no de la carga. El SDS también desnaturaliza las proteínas y subunidades para ayudar a separarlas según el tamaño, no según la forma.