New England Biolabs, E2050S, Kit de síntesis rápida de ARN de alto rendimiento HiScribe® T7

Ahora incluye un tubo separado de DTT Categorías relacionadas Síntesis de sgRNA, Síntesis de ARN Transcripción in vitro (IVT), Soluciones de nucleótidos para ARN Especificación Materiales necesarios pero no suministrados Agua libre de nucleasas (NEB #B1500) Preguntas frecuentes P: ¿Cómo puedo mejorar un bajo rendimiento de ARN de la reacción de transcripción? R: Si la reacción de transcripción con su plantilla genera ARN de longitud completa pero el rendimiento es significativamente menor de lo esperado, es posible que los contaminantes en la plantilla de ADN estén inhibiendo la ARN polimerasa o que la concentración de ADN sea incorrecta. Alternativamente, puede requerirse una purificación adicional de la plantilla de ADN. Agregar 5 mM de DTT (final) a la reacción de transcripción también puede ayudar a mejorar el rendimiento del ARN. P: ¿Se incluyen nucleótidos modificados en el kit? R: Los nucleótidos modificados no están incluidos en el kit, pero se pueden comprar por separado. NEB puede proporcionar N1-Metil-Pseudouridina-5'-Trifosfato (NEB #N0431), 5-Metil-Citidina-5'-Trifosfato (NEB #N0432), Pseudouridina-5'-Trifosfato (NEB #N0433) y 5-Metoxi-Uridina-5'-Trifosfato (NEB #N0434). El manual del kit incluye un protocolo detallado para el uso de nucleótidos modificados en la reacción de transcripción. P: ¿Es necesario añadir DTT a la reacción? R: Añadir DTT (5 mM final) a la reacción es opcional, pero se recomienda. La ARN polimerasa del kit es sensible a la oxidación y podría reducir la producción de ARN con el tiempo debido a la manipulación repetida, etc. Añadir DTT a la reacción puede ayudar a restaurar el rendimiento del kit en estos casos. Añadir DTT no afectará la reacción en ningún caso.