New England Biolabs, E7771L, módulo de síntesis de primera cadena de ARN NEBNext® Ultra™ II

Categorías relacionadas Automatización para la preparación de bibliotecas NGS de NEBNext®, Preparación de bibliotecas de ARN para Illumina, Especificación de preparación de bibliotecas de secuenciación de próxima generación Materiales necesarios pero no suministrados Módulo de aislamiento magnético de ARNm de poli(A) NEBNext (NEB n.° E7490) o Kit de depleción de ARNr NEBNext® v2 (humano/ratón/rata) (NEB n.° E7400 o NEB n.° E7405) o Kit de depleción de globina y ARNr NEBNext® (humano/ratón/rata) (NEB n.° E7750 o NEB n.° E7755) o Kit de depleción de ARNr NEBNext® (bacterias) (NEB n.° E7850 o NEB n.° E7860) o Conjunto de reactivos básicos de depleción de ARNr NEBNext® (NEB n.° E7865 o NEB n.° E7870) o Kit de depleción de ARNr NEBNext Kit (humano/ratón/rata) (NEB n.º E6310 o NEB n.º E6350) Módulo de síntesis de segunda cadena de ARN direccional NEBNext Ultra II (NEB n.º E7550) o Módulo de síntesis de segunda cadena de ARN no direccional NEBNext Ultra II (NEB n.º E6111) Placa o rejilla magnética (p. ej., rejilla de separación magnética NEBNext® (NEB n.º S1515S), placa supermagnética Alpaqua ® 96S (n.º A001322) o equivalente) Preguntas frecuentes P: ¿Qué otros materiales necesito además del módulo de síntesis de primera cadena NEBNext Ultra II para los experimentos de secuenciación de ARN? R: Si está comenzando con ARN total, le recomendamos el módulo de aislamiento magnético de ARNm NEBNext Poly(A) (NEB n.° E7490) o el kit de depleción de ARNr NEBNext v2 (humano/ratón/rata) (NEB n.° E7400 o NEB n.° E7405) o el kit de depleción de globina y ARNr NEBNext® (humano/ratón/rata) (NEB n.° E7750 o NEB n.° E7755) o el kit de depleción de ARNr NEBNext® (bacterias) (NEB n.° E7850 o NEB n.° E7860) o el conjunto de reactivos centrales de depleción de ARN NEBNext® (NEB n.° E7865 o NEB n.° E7870) o el kit de depleción de ARNr NEBNext (humano/ratón/rata) (NEB n.° E6310 o NEB n.° E6350) para utilizar antes de la síntesis de la primera cadena. Para flujos de trabajo de ARN-seq específicos de cadena, utilice los siguientes kits: NEBNext Ultra II Directional RNA Second Strand Synthesis Module (NEB n.º E7550) NEBNext Ultra II End Repair/dA-Tailing Module (NEB n.º E7546) NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB n.º E7595) NEBNext Ultra II Q5 Master Mix (NEB n.º M0544) Para flujos de trabajo de ARN-seq no direccionales, utilice los siguientes kits: NEBNext Ultra II Non-Directional RNA Second Strand Synthesis Module (NEB n.º E6111) NEBNext Ultra II End Repair/dA-Tailing Module (NEB n.º E7546) NEBNext Ultra II Ligation Module (NEB n.º E7595) NEBNext Ultra II Q5 Master Mix (NEB n.º M0544) Para adaptadores y cebadores, los oligonucleótidos NEBNext son compatibles, al igual que los adaptadores y cebadores de otras fuentes. P: ¿Qué pasa si ya he fragmentado mi ARN total y necesito realizar la reacción de síntesis de primera cadena? R: Si parte de ARN total fragmentado, recomendamos usar el kit de depleción de ARNr NEBNext (humano/ratón/rata; n.° E6310) antes de la síntesis de primera cadena. Siga el protocolo del capítulo 3 del kit de preparación de biblioteca de ARN direccional Ultra II (n.° E7760) para flujos de trabajo de secuenciación de ARN específicos de cada cadena. Para flujos de trabajo de secuenciación de ARN no direccional, siga el protocolo del capítulo 3 del kit de preparación de biblioteca de ARN Ultra II (n.° E7770). P: ¿Qué pasa si ya he fragmentado mi ARNm y solo necesito realizar la reacción de síntesis de primera cadena? R: Si parte de ARNm fragmentado, recomendamos seguir el protocolo del capítulo 5 del kit de preparación de biblioteca de ARN direccional Ultra II (n.° E7760) para flujos de trabajo de secuenciación de ARN específicos de cada cadena. Para flujos de trabajo de secuenciación de ARN no direccional, siga el protocolo del Capítulo 5 del Kit de preparación de biblioteca de ARN Ultra II (n.° E7770). P: ¿Cuál es la composición de los cebadores aleatorios? R: Los cebadores aleatorios son hexámeros aleatorios suministrados a 1,9 mM.