New England Biolabs, M0261L, ADN polimerasa Therminator™

La ADN polimerasa Therminator es una variante de la ADN polimerasa 9°N™ con una capacidad mejorada para incorporar sustratos modificados como didesoxinucleótidos, ribonucleótidos y aciclonucleótidos (1,2). Categorías relacionadas : Etiquetado de ADN. Especificación . Definición de unidad. Una unidad se define como la cantidad de enzima que incorporará 10 nmol de dNTP en material insoluble en ácido en 30 minutos a 75 °C. Condiciones de reacción 1X Tampón de reacción ThermoPol® 1X Tampón de reacción ThermoPol® 20 mM Tris-HCl 10 mM (NH4)2SO4 10 mM KCl 2 mM MgSO4 0,1 % Triton® X-100 (pH 8,8 a 25 °C) Tampón de almacenamiento 10 mM Tris-HCl 100 mM KCl 1 mM DTT 0,1 mM EDTA 50 % Glicerol pH 7,4 a 25 °C Inactivación por calor No Peso molecular Teórico: 90000 daltons Exonucleasa 5' - 3' No Exonucleasa 3' - 5' No Desplazamiento de cadena + Unidad Condiciones del ensayo 1X Tampón de reacción ThermoPol, 200 µM dNTP que incluyen [3H]-dTTP y 15 nM cebados M13mp18 monocatenario. Preguntas frecuentes : P: ¿Se puede usar la ADN polimerasa Therminator™ en otros tampones? R: No se recomienda sustituir los tampones. P: ¿Cuándo se debe usar la ADN polimerasa Therminator™? R: Cuando se deben incorporar nucleótidos modificados como didesoxinucleótidos, ribonucleótidos y aciclonucleótidos. P: ¿Se puede sustituir la ADN polimerasa Therminator™ por la ThermoSequenase™? R: Sí, ambas incorporan nucleótidos modificados. Para laboratorios que requieren grandes cantidades de polimerasa, usar la ADN polimerasa Therminator podría resultar en un ahorro considerable de costos. Puede ser necesario optimizar la reacción de la ADN polimerasa Therminator para diversas aplicaciones. P: ¿Se puede usar la ADN polimerasa Therminator™ para secuenciación? R: La ADN polimerasa Therminator se puede usar para secuenciación, pero puede que se requiera optimización y licencia. Usar la mezcla de nucleótidos ABI estándar no produce resultados óptimos. P: ¿Por qué algunas de las A de mi secuencia son débiles al usar la ADN polimerasa Therminator™? R: En las condiciones de secuenciación analizadas, la A después de la C genera constantemente una señal débil.