New England Biolabs, M0597S, mezcla maestra NEBNext® Q5U®

NEBNext® Q5U® Master Mix contiene una versión modificada de la ADN polimerasa de alta fidelidad Q5®, optimizada para la amplificación de bibliotecas NGS que contienen uracilo. Esta formulación de inicio rápido está diseñada para leer uracilos, lo que proporciona una amplificación de biblioteca robusta, de alta fidelidad y uniforme. Categorías relacionadas: Análisis de la metilación del ADN por conversión con bisulfito, Análisis de la metilación del ADN, Epigenética, Aplicaciones de las polimerasas para la preparación de bibliotecas NGS, Preguntas frecuentes sobre PCR especializada. P: ¿Se puede usar NEBNext Q5U Master Mix para amplificar plantillas que contienen uracilos? R: Sí. NEBNext Q5U Master Mix contiene la ADN polimerasa de alta fidelidad Q5U Hot Start, que puede amplificar ADN que contiene uracilos. Esta formulación se puede usar con una variedad de entradas de ADN, incluyendo ADN convertido mediante protocolos EM-seq y bisulfito. P: ¿Es NEBNext Q5U Master Mix una formulación de inicio rápido? R: Sí, la mezcla maestra NEBNext Q5U es una formulación de inicio en caliente, y las reacciones de PCR se pueden preparar en hielo o a temperatura ambiente. P: ¿Qué condiciones de ciclado debo usar para la mezcla maestra NEBNext Q5U? R: Las condiciones de ciclado se han optimizado para una amplificación robusta y de bajo sesgo de bibliotecas EM-seq. Se recomienda una temperatura de extensión de 65 °C para esta aplicación. P: ¿Cuántos ciclos de PCR debo realizar con la mezcla maestra NEBNext Q5U? R: Esto depende de la cantidad de entrada. Al usar el kit NEBNext Enzymatic Methyl-seq (NEB n.° E7120), consulte las directrices incluidas en el protocolo. P: ¿Los productos de ADN producidos por la mezcla maestra NEBNext Q5U tienen extremos romos o tienen una sola base saliente en el extremo 3'? R: Como todos los productos Q5, la mezcla maestra NEBNext Q5U produce extremos romos. P: ¿La mezcla maestra NEBNext Ultra II Q5 incorporará dUTP? R: No. La mezcla maestra NEBNext Ultra II Q5 no incorpora dUTP y no es compatible con ADN tratado con bisulfito. Para protocolos que emplean ADN tratado con bisulfito, se puede utilizar la mezcla maestra NEBNext(r) Q5U(r) (o la ADN polimerasa EpiMark(tm) Hot Start).