New England Biolabs, M0651S, TelN Protelomerasa

Reactivo de grado GMP también disponible. Categorías relacionadas Otra especificación Unidad Definición Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para escindir 0,5 μg de plásmido de control linealizado pMiniT-TelN BsaI (313 fmol de sitios de reconocimiento de TelN) en un volumen de reacción total de 50 μl en 30 minutos a 30 °C en tampón de reacción ThermoPol 1X. Condiciones de reacción Tampón de reacción ThermoPol® 1X Incubar a 30 °C Tampón de reacción ThermoPol® 1X 20 mM Tris-HCl 10 mM (NH4)2SO4 10 mM KCl 2 mM MgSO4 0,1 % Triton® X-100 (pH 8,8 a 25 °C) Inactivación por calor 75 °C durante 5 minutos Preguntas frecuentes P: ¿Cuál es la estructura en el sitio de escisión del dsADN después de la digestión con la protelomerasa TelN? R: A diferencia de los extremos de escisión generados por la mayoría de las enzimas de restricción, los extremos generados por la proteomerasa TelN no son pegajosos ni romos. Los extremos tienen estructuras de horquilla con extremos cerrados covalentemente que son resistentes a la digestión por exonucleasas (p. ej., exonucleasa Lambda, exonucleasa M0663 T5, exonucleasa V, exonucleasa III, exonucleasa VIII (truncada) y exonucleasa T7). P: ¿Digiere la proteomerasa TelN las secuencias de reconocimiento de TelN en dsADN superenrollado (p. ej., plásmido) o dsADN lineal? R: Sí, la proteomerasa TelN digiere tanto el dsADN superenrollado como el lineal que contienen sitios de reconocimiento de TelN. P: ¿Cuál es la actividad de la proteomerasa TelN en tampones comunes? A: % de actividad del tampón Tampón Thermopol 100 Tampón de reacción de ADN polimerasa NEB phi29 25 Tampón Qiagen phi29 < 1 Tampón NE 1,1 50 Tampón NE 2,1 25 Tampón NE 3,1 < 1 Tampón Cutsmart 50 Tampón de reacción de ADN polimerasa Taq 50 Tampón de reacción IsoAmp 50 Tampón de reacción LongAmp Taq 50 Tampón de reacción de ADN polimerasa de alta fidelidad Q5 < 1 Tampón de reacción Phusion HF 12,5 Tris-HCl (pH 7,5) 50 Tris-HCl (pH 8) 75 Tris-HCl (pH 8,3) 50 Tris-HCl (pH 8,8) 75 Tricina (pH 8,7) 50 P: ¿Puedo comprar grandes cantidades de una enzima existente para innovación? R: Sí, si necesita grandes cantidades de una enzima para la innovación, póngase en contacto con NEB en EnzymesForInnovation@neb.com. Tenga en cuenta que la disponibilidad puede ser limitada y, por lo tanto, se requieren plazos de entrega más largos para pedidos grandes. También podrían ser necesarias pruebas de control de calidad adicionales para satisfacer su aplicación y necesidades específicas. P: ¿Qué son las enzimas para la innovación? R: Enzymes for Innovation (EFI) es un proyecto iniciado por NEB para proporcionar enzimas únicas a la comunidad científica con la esperanza de facilitar el descubrimiento de aplicaciones nuevas e innovadoras. Estas enzimas tienen propiedades interesantes y especificidades únicas que no están disponibles comercialmente en otros lugares con la calidad que se espera de NEB. Las enzimas graduadas de Enzymes for Innovation son enzimas que han pasado de tener aplicaciones desconocidas o exploratorias a convertirse en la piedra angular de una aplicación definida. Si tiene una idea para una "Enzima para la innovación" con una aplicación sugerida que pueda ser útil, envíenos un correo electrónico a EnzymesForInnovation@neb.com. Para obtener más información, vea el vídeo.