New England Biolabs, N0447L, Mezcla de solución de desoxinucleótidos (dNTP)

Categorías relacionadas Soluciones de nucleótidos Aplicaciones Amplificación del genoma completo y amplificación por desplazamiento múltiple, Amplificación mediada por transcripción y NASBA, Amplificación por desplazamiento de cadena y enzima de mellado, Preguntas frecuentes P: ¿Qué se suministra con la mezcla de solución de desoxinucleótidos? R: Cada vial contiene 8 μmol en un volumen de 0,8 ml. Un paquete pequeño contiene 4 viales de 0,2 ml y un paquete grande contiene 5 viales de 0,8 ml. P: ¿Qué hay en la mezcla de solución de desoxinucleótidos? R: Una mezcla equimolar de dATP, dCTP, dGTP y dTTP ultrapuros. P: ¿Qué tan estables son los nucleótidos? R: Cuando se almacenan a -20 °C, son estables durante años. Si se congelan y descongelan con frecuencia, deberían ser estables durante un año. Si las soluciones se almacenan a 4 °C, las bacterias pueden crecer en ellas. El crecimiento bacteriano se acelera si la solución se diluye en un tampón que contenga magnesio. Deseche las soluciones almacenadas a 4 °C después de una semana. P: ¿Cuál es la concentración de la mezcla de solución de desoxinucleótidos? R: La concentración es de 10 mM de cada dNTP. P: ¿Con qué polimerasas se puede usar la mezcla de solución de desoxinucleótidos? R: Cualquier ADN polimerasa de NEB. P: ¿En qué se diferencia este producto del juego de soluciones de desoxinucleótidos (NEB n.º N0446)? R: El juego de soluciones de desoxinucleótidos contiene cuatro viales, uno con dATP, dCTP, dGTP y dTTP. La concentración de cada uno es de 100 mM. Si se mezclan volúmenes iguales de nucleótidos del juego de soluciones de desoxinucleótidos, la concentración sería de 25 mM de cada dNTP. P: Si se requiere una concentración final de 200 μM de cada dNTP, ¿cuánto de la mezcla se debe agregar a una reacción de 100 μl? R: Agregue 2 μl. Determinado por la ecuación: 100 μl x 200 μM = x μl x 10 mM. La conversión da como resultado: 100 μl x 200 μM = x μl x 10 000 μM. Resolviendo la ecuación, se obtiene x = 2 μl.