New England Biolabs, N0460S, Conjunto de aciclonucleótidos

Categorías relacionadas Soluciones de nucleótidos Aplicaciones Secuenciación de ADN, PCR, Preguntas frecuentes sobre PCR P: ¿Los sustratos terminados con aciclonucleósidos 3' son resistentes a la actividad de la exonucleasa 3'-5'? R: La actividad de la exonucleasa 3'-5' de las ADN polimerasas escindirá los aciclonucleósidos 3' en el extremo de los sustratos de ADN. P: ¿Qué ADN polimerasas incorporan aciclonucleótidos? R: La ADN polimerasa Therminator ha sido diseñada para incorporar aciclonucleótidos de manera eficiente. Otras ADN polimerasas de la Familia B deficientes en exonucleasas (exo-), incluidas Vent exo- y Deep Vent exo-, también incorporan aciclonucleótidos de manera menos eficiente. Los aciclonucleótidos no son incorporados de manera eficiente por la ADN polimerasa Taq o Klenow exo-. P: ¿Se pueden usar aciclonucleótidos en la secuenciación de Sanger? A: Los aciclonucleótidos son terminadores que pueden sustituir a los ddNTP en las reacciones de secuenciación de Sanger cuando se usan con la ADN polimerasa Therminator (Gardner, A. y Jack, W. (2002) Acyclic and didesoxy terminator preferences denote divergent sugar recognition by archaeon and Taq DNA polymerases. Nuc. Acids Res. PMID: 11788725; Gardner, AF, Joyce, CM y Jack, WE (2004) Comparative kinetics of nucleotide analog incorporation by Vent DNA polymerase. J. Biol. Chem. 279, 11834-11842. PMID: 14699133). P: ¿Se pueden usar los aciclonucleótidos para la secuenciación por síntesis? R: Los aciclonucleótidos son terminadores no reversibles que no se pueden usar en flujos de trabajo que requieren la reversión de la terminación, como la secuenciación por síntesis.