New England Biolabs, N0494S, Escalera de ADN superenrollada extendida

Supercoiled Extend DNA Ladder permite dimensionar con precisión una amplia gama de ADN superenrollado, incluidos plásmidos superenrollados de hasta 15 kb, y tiene una banda de referencia conveniente a 6 kb. Categorías relacionadas Marcadores y escaleras,, Marcadores de ADN y escaleras Aplicaciones Análisis de ADN Especificación Bases Masa del fragmento (ng) pb 1 45 14996 2 45 12000 3 45 10002 4 45 8001 5 136 6000 6 45 5000 7 45 4000 8 45 3001 9 45 2017 Rango de tamaño efectivo 2017 pb a 14 996 pb Tampón de almacenamiento 10 mM Tris-HCl 1 mM EDTA pH 8 a 25 °C Preguntas frecuentes P: ¿Puedo usar Midori Green con las escaleras de ADN de NEB? R: Las escaleras de ADN NEB, incluido el Quick-Load Purple 1 kb Plus DNA Ladder (NEB n.º N0550), son compatibles con el colorante Midori Green sin que se observen interferencias. Siga estrictamente las recomendaciones del fabricante del colorante. Debido a la baja intensidad del colorante, es posible que necesite cargar entre 1 y 2 µg de la escalera de ADN para lograr una buena visualización en condiciones de iluminación UV estándar. P: ¿Puedo usar colorantes SYBR® o GelRed® con las escaleras de ADN de NEB? R: Dado que los colorantes de alta afinidad para la unión de ácidos nucleicos pueden afectar la migración del ADN durante la electroforesis, se recomienda encarecidamente la tinción posterior de los geles con colorantes SYBR y GelRed. La tinción posterior a la electroforesis proporciona una sensibilidad superior y elimina la posibilidad de interferencia del colorante con la migración del ADN. Si bien los geles de agarosa se pueden prefabricar con estos colorantes, la migración o la resolución de algunas escaleras de ADN pueden verse afectadas. Por lo tanto, algunas escaleras de ADN pueden requerir optimización/dilución al procesarse en geles prefabricados con estos colorantes. Para obtener resultados óptimos, siga atentamente las recomendaciones y protocolos del fabricante del colorante, especialmente en lo que respecta a las cantidades de carga. Recomendamos usar nuestra escalera de ADN 1 kb Plus para tinciones seguras (NEB n.º N0559) al usar SYBR o GelRed como tintes prefabricados, ya que esta escalera de ADN fue optimizada específicamente para esta aplicación. Además, evite usar tintes de carga que contengan SDS, ya que el SDS podría causar un patrón de banda anormal en los geles prefabricados. Recomendamos usar el tinte de carga de gel, púrpura (6X), sin SDS (NEB n.º B7025) para esta aplicación. P: ¿Por qué mi escalera de ADN flota fuera de los pocillos? ¿Por qué no hay bandas visibles en el carril de gel de mi escalera de ADN? R: Si la escalera de ADN lista para cargar o el tinte de carga 6X que se suministra con la escalera se ha congelado en algún momento, el Ficoll formará un gradiente de densidad en el vial al descongelarse. Cualquier volumen pipeteado desde la parte superior del vial contendrá solo una pequeña cantidad de agente densificador y flotará fuera de los pocillos. Para evitar esto, mezcle bien al recibirlo y antes de usarlo.