New England Biolabs, N3013L, ADN Lambda (dam-)

Categorías relacionadas Plásmidos y sustratos de ADN Especificación Tampón de almacenamiento 10 mM Tris-HCl 1 mM EDTA pH 8 a 25 °C Preguntas frecuentes P: ¿Cuál es la secuencia de ADN de este producto? R: La secuencia de ADN se puede encontrar en la herramienta Secuencias de ADN y mapas. P: ¿El ADN Lambda (NEB #N3011) y el ADN Lambda (dam-) (NEB #N3013) están metilados? R: El ADN Lambda N3011 está metilado, pero no sabemos exactamente qué sitios A y C se metilan, ya que la metilación en Lambda no es del 100 %. El ADN se extrae de una E. coli dam+, dcm+, EcoK+ (cepa C190). NEB también ofrece ADN Lambda (dam-) (NEB #N3013), que se cultiva en una cepa de E. coli que es dam-, dcm+, EcoK+ (cepa GM33). La metilasa codificada por el gen dam (Dam metilasa) transfiere un grupo metilo a la posición N6 de los residuos de adenina en la secuencia GATC (1,2). La metilasa Dcm, codificada por el gen dcm, metila los residuos internos de citosina en las secuencias CCAGG y CCTGG (1,3) en la posición C5. La metilasa EcoKI, M.EcoKI, modifica los residuos de adenina en las secuencias AAC(N6)GTGC y GCAC(N6)GTT. Para más información, consulte: https://www.neb.com/tools-and-resources/selection-charts/dam-dcm-and-cpg-methylation No todo el ADN aislado de E. coli está metilado en la misma medida. Aunque el ADN pBR322 está completamente modificado, solo alrededor del 50 % de los sitios de represa del ADN Lambda están metilados, presumiblemente porque la metilasa no tiene la oportunidad de metilar completamente el ADN antes de que se empaquete en la cabeza del fago. 1. Marinus, MG y Morris, NR (1973) J. Bacteriol. 114, 1143–1150. PMID: 4576399 2. Geier, GE y Modrich, P. (1979) J. Biol. Chem. 254, 1408–1413. PMID: 368070 3. May, MS y Hattman, S. (1975) J. Bacteriol. 123, 768–770. PMID: 1097428