New England Biolabs, P6010S, caseína quinasa II (CK2)

La caseína quinasa II (CKII) es una proteína quinasa de serina/treonina constitutivamente activa, compuesta por dos subunidades α catalíticas de 44 kDa y dos subunidades β reguladoras de 26 kDa en una configuración α2β2 para formar heterotetrámeros estables. El motivo de reconocimiento general para la fosforilación por CKII es SXXE/D. Categorías relacionadas: Aplicaciones de las proteína quinasas: Proteínas fosfatasas y quinasas. Especificación: Unidad. Definición: Una unidad de enzima cataliza la fosforilación de 1 pmol de sustrato RRRDDD S DDD en 10 minutos a 30 °C. Condiciones de reacción 1X NEBuffer™ para proteinas quinasas (PK) Suplemento con 200 µM de ATP Incubar a 30 °C 1X NEBuffer™ para proteinas quinasas (PK) 50 mM Tris-HCl 10 mM MgCl2 0,1 mM EGTA 2 mM DTT 0,01 % Brij 35 (pH 7,5 a 25 °C) Tampón de almacenamiento 20 mM Tris-HCl 350 mM NaCl 1 mM EDTA 2 mM DTT 0,1 % Triton® X-100 pH 7,5 a 25 °C Notas de almacenamiento Evite los ciclos repetidos de congelación/descongelación. Preguntas frecuentes P: ¿Pueden recomendar inhibidores para CK2 (P6010)? R: La heparina inhibe a una Ki de 1,4 nM. P: ¿Cuánta caseína quinasa II (NEB# P6010) se debe usar? R: La cantidad de enzima necesaria varía según el sustrato. Comience con 1-2 µl para 1 µg de proteína durante una hora en una reacción de 10-25 µl. Si aún queda material sin fosforilar, deje que la reacción continúe durante toda la noche. P: ¿Cuál es la secuencia consenso de esta CK2 (P6010)? R: La secuencia consenso es SXXE/D. Esta quinasa fosforila residuos de serina o treonina que se encuentran en el extremo N-terminal de los aminoácidos ácidos.