New England Biolabs, P7718S, Estándar de proteína preteñido en azul, amplio rango (11–250 kDa)

El estándar de proteína preteñida azul, amplio rango es una mezcla de proteínas preteñidas recombinantes de alta pureza, acopladas covalentemente con un cromóforo azul, que se resuelve en 11 bandas nítidas cuando se someten a electroforesis. Categorías relacionadas Estándares de proteínas,, Marcadores y escaleras,, Aplicaciones de estándares de proteínas Estándares de proteínas,, Herramientas de análisis de proteínas Especificación Tampón de almacenamiento 62,5 mM Tris-fosfato 1 mM EDTA 2% SDS 10 mM DTT 1 mM NaN3 33% Glicerol pH 7,5 a -20 °C Preguntas frecuentes P: ¿En qué se diferencia el nuevo estándar de proteína preteñida azul, amplio rango del estándar de proteína preteñida azul anterior de NEB? R: El nuevo estándar de proteína preteñida azul (NEB n.º P7718) se puede utilizar como reemplazo directo del estándar de proteína preteñida azul anterior (NEB n.º P7706). Las proteínas utilizadas en el nuevo Estándar de Proteínas Azules Preteñidas son diferentes a las utilizadas en el Estándar de Proteínas Azules Preteñidas anterior, por lo que es importante tener en cuenta que los pesos moleculares aparentes serán ligeramente diferentes. El nuevo Estándar de Proteínas Azules Preteñidas contiene 11 proteínas con un peso molecular de entre 11 y 250 kDa, mientras que el Estándar de Proteínas Azules Preteñidas anterior contenía 11 proteínas con un peso molecular de entre 11 y 190 kDa. P: ¿Cuál es la concentración proteica de las proteínas utilizadas en el Estándar de Proteínas Azules Preteñidas de Amplio Rango? R: La concentración proteica total del Estándar de Proteínas Azules Preteñidas de Amplio Rango es de aproximadamente 2,5 mg/ml. Sin embargo, esto es solo una estimación. No recomendamos utilizar este ni ningún otro estándar de proteínas como herramienta para la cuantificación precisa de la concentración proteica. Estos productos están diseñados para estimar el peso molecular de las proteínas. P: ¿Qué volumen se suministra en un paquete pequeño y un paquete grande de Estándares de Proteínas de NEB? R: Los paquetes pequeños de los estándares de proteína NEB (NEB n.° P7717, n.° P7718 y n.° P7719) contienen 0,45 ml, lo que equivale a 150 carriles de gel con el volumen de carga de minigel recomendado de 3 µl. Los paquetes grandes contienen 2,25 ml, lo que equivale a 750 carriles de gel con el volumen de carga de minigel recomendado de 3 µl. P: Observo que los pesos moleculares que observo son ligeramente diferentes a los informados. ¿Podría explicarlo? R: Los valores de peso molecular aparente del estándar de proteína preteñido azul de amplio rango pueden variar al analizarse con distintos tipos y porcentajes de gel. Esta disparidad se debe a las diferentes formulaciones de los distintos geles (agentes tampón, fuerza iónica y pH). Estas diferencias se deben a la unión covalente del colorante a las proteínas utilizadas en el estándar. Estas moléculas pueden transportar una carga, lo que modifica la capacidad del SDS para unirse a la proteína y contribuye a su carga total. Esta carga alterada alterará su movilidad dentro del gel. Hemos analizado el Estándar de Proteína de Amplio Rango Preteñido Azul de NEB utilizando diversos tipos de gel de uso común. Los resultados se muestran a continuación: P: Accidentalmente dejé mi Estándar de Proteína a temperatura ambiente durante varios días. ¿Puedo usarlo? R: Las pruebas de estabilidad han demostrado que los Estándares de Proteína de NEB se mantienen estables hasta dos semanas a temperatura ambiente (25 °C) y hasta un año a 4 °C. Sin embargo, no recomendamos almacenar su Estándar de Proteína a una temperatura diferente a la óptima, que es de -20 °C, para una vida útil garantizada de 2 años.