New England Biolabs, P8010S, proteasa del factor Xa

El factor Xa escinde después del residuo de arginina en su sitio de escisión preferido Ile-Glu/Asp-Gly-Arg. A veces escindirá en otros residuos básicos, dependiendo de la conformación del sustrato proteico. El sitio secundario más común, entre los que se han secuenciado, es Gly-Arg. Categorías relacionadas Proteasas Aplicaciones Escisión de proteínas de fusión,, Insolubilidad de la proteína diana,, Purificación de proteínas, Especificación Unidad Definición 1 μg de factor Xa escindirá 50 μg de sustrato de prueba de proteína de fusión MBP, MBP-FXa-Paramyosin-ΔSal al 95% de finalización en un volumen de reacción total de 50 μl en 6 horas o menos a 25 °C en 20 mM Tris-HCl (pH 8,0 a 25 °C) con 100 mM NaCl y 2 mM CaCl2. Concentración de uso: 1 mg/ml. Eliminación: El factor Xa se une específicamente a la benzamidina-agarosa. Tampón de almacenamiento: HEPES 50 mM, NaCl 500 mM, CaCl₂ 2 mM, glicerol al 50 %, pH 8 a 25 °C. Peso molecular teórico: 43 kDa. Desactivación: La dansil-glu-gli-arg-clorometilcetona (CALBIOCHEM, n.° 251700) inactiva irreversiblemente el factor Xa mediante unión covalente en el sitio activo. En una reacción con 20 μg/ml de factor Xa, 2 μM de dansil-glu-gli-arg-clorometilcetona inactivan más del 95 % del factor Xa en 1 minuto a temperatura ambiente.