Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra, R0138L, SalI

El tamaño grande concentrado de este producto se discontinuó el 15 de diciembre de 2025. El tamaño pequeño concentrado seguirá estando disponible. Categorías relacionadas Endonucleasas de restricción S,, Enzimas de restricción calificadas que ahorran tiempo Aplicaciones Clonación rápida: acelere sus flujos de trabajo de clonación con reactivos de NEB,, Definición de la unidad de especificación de digestión con enzimas de restricción Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para digerir 1 µg de ADN λ (digestión HindIII) en 1 hora a 37 °C en un volumen de reacción total de 50 μl. Condiciones de reacción 1X NEBuffer™ r3.1 Incubar a 37 °C 1X NEBuffer™ r3.1 100 mM NaCl 50 mM Tris-HCl 10 mM MgCl2 100 µg/ml Albúmina recombinante (pH 7,9 a 25 °C) Actividad en NEBuffers NEBuffer™ r1.1: <10 % NEBuffer™ r2.1: <10 % NEBuffer™ r3.1: 100 % Tampón rCutSmart™: <10 % Compatibilidad del diluyente Diluyente A Tampón de almacenamiento 10 mM Tris-HCl 50 mM KCl 1 mM DTT 0,1 mM EDTA 300 µg/ml BSA 50 % Glicerol pH 7,5 a 25 °C Inactivación por calor a 65 °C durante 20 minutos Sensibilidad a la metilación Metilación en dam: no sensible Metilación en dcm: no sensible Metilación en CpG: bloqueada Preguntas frecuentes P: ¿SalI se ve afectada por la metilación? R: SalI se ve bloqueada por la metilación en CpG. Para obtener información actualizada sobre las sensibilidades a la metilación, visite Dam-Dcm y metilación en CpG o REBASE. P: ¿SalI es sensible al pH? R: La actividad de SalI disminuye si el pH del tampón de reacción no está entre 7,8 y 8,0. P: ¿SalI se ve afectada por la actividad estrella? R: Sí, un alto nivel de glicerol, una alta concentración de enzimas o tiempos de reacción prolongados pueden causar la actividad estrella de SalI. P: ¿SalI presenta una actividad reducida en el ADN superenrollado? R: Los plásmidos superenrollados pueden requerir hasta 10 veces más SalI para una digestión completa que en el ADN lineal. P: ¿Cuántas bases requiere SalI para la escisión cerca de los extremos? R: Al cortar cerca de los extremos de los fragmentos de ADN, la escisión debe realizarse a 37 °C durante una hora utilizando 10 unidades/μg de ADN con un mínimo de 3 bases en cada lado de la secuencia de reconocimiento. P: ¿Cuál es el peso molecular de SalI? R: 30 kDa. P: ¿Se requieren más unidades de SalI para cortar ADN superenrollado que ADN lambda? R: Los plásmidos limus superenrollados, pBR322 y pUC requieren hasta 10 veces más enzima para lograr una digestión completa. P: ¿Cuál es la actividad de SalI a 25 °C? R: Tiene una actividad del 50-75 %. P: ¿Tengo que configurar las digestiones con enzimas calificadas Time-Saver™ durante 5-15 minutos? ¿Puedo digerir más tiempo? R: Las enzimas Time-Saver™ de NEB tienen la ventaja de trabajar rápido (5-15 minutos), pero también están diseñadas y calificadas para soportar digestiones durante la noche sin degradación del ADN. P: ¿Qué enzimas de restricción NEB se suministran con el colorante de carga de gel morado (6X)? R: Todas las enzimas de restricción HF y la mayoría de las enzimas de restricción NEB no HF se suministran con el colorante de carga de gel morado (6X). Las enzimas de restricción no HF que vienen suministradas con el tinte púrpura son: AatII AsiSI BsmBI-v2 EagI MboI NlaIII PvuI SmaI Acil AvrII BspHI EcoRI MboII NotI RsaI SpeI AfeI BamHI BsrGI EcoRV MluI NspI SacI StuI AflII BbsI ClaI Esp3I FseI MseI PacI SacII AgeI BglII DdeI HaeIII MspI PciI SalI XbaI AluI BsaI DpnI HindIII NcoI PmeI SapI XhoI ApaI BseYI DpnII HpaI NdeI PsiI-v2 SfaNI XmaI ApeKI BsiWI DraI KpnI NheI PstI SfiI XmnI AscI * Todas las enzimas de restricción HF también se suministran con tinte de carga en gel, morado (6X) P: ¿Puedes contarme más? ¿Qué opina sobre la transición de BSA a albúmina recombinante (rAlbúmina) en los tampones NEB? R: NEB se complace en anunciar la transición de los tampones de reacción con BSA (NEBuffer 1.1, 2.1, 3.1 y CutSmart® Buffer) a tampones con albúmina recombinante (NEBuffer r1.1, r2.1, r3.1 y rCutSmart™ Buffer). También estamos en proceso de adaptar todas las formulaciones de enzimas de restricción para que contengan rAlbúmina. Creemos que dejar de usar productos de origen animal es un paso en la dirección correcta y podemos ofrecer esta mejora al mismo precio.