Laboratorios Biológicos de Nueva Inglaterra, R0627S, Nt.AlwI

Categorías relacionadas Endonucleasas de mellado, Endonucleasas de restricción: NO Especificación Unidad Definición Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para convertir 1 µg de ADN pUC101 superenrollado (dam- / dcm- ) a una forma circular abierta en 1 hora a 37 °C en un volumen de reacción total de 50 μl. Condiciones de reacción Tampón rCutSmart™ 1X Incubar a 37 °C Tampón rCutSmart™ 1X Acetato de potasio 50 mM Tris-acetato 20 mM Acetato de magnesio 10 mM Albúmina recombinante 100 µg/ml (pH 7,9 a 25 °C) Actividad en tampones NE Tampón NE™ r1.1: 10 % Tampón NE™ r2.1: 100 % Tampón NE™ r3.1: 100 % Tampón rCutSmart™: 100 % Compatibilidad del diluyente Diluyente A Tampón de almacenamiento Tris-HCl 10 mM KCl 50 mM DTT 1 mM EDTA 0,1 mM 200 µg/ml BSA Glicerol al 50 % pH 7,4 a Inactivación térmica a 25 °C. 80 °C durante 20 minutos. Sensibilidad a la metilación. Metilación en dam: bloqueada. Metilación en dcm: insensible. Metilación en CpG: insensible. Preguntas frecuentes : P: ¿Cuál es la actividad de las enzimas de corte a diferentes temperaturas? R: La actividad de las enzimas de corte NEB a diferentes temperaturas se puede encontrar en la tabla "Efecto de varias temperaturas en las endonucleasas de corte". P: ¿Esta enzima es sensible a la metilación en dam, dcm o CpG de mamíferos? R: Sí. Esta enzima no puede cortar los sitios de reconocimiento bloqueados por la metilación en dam. Para obtener información actualizada sobre la sensibilidad a la metilación, visite Dam-Dcm y metilación en CpG o REBASE. P: ¿Puede decirme más sobre el cambio de BSA a albúmina recombinante (rAlbúmina) en NEBuffers? A: NEB se complace en anunciar que hemos cambiado los tampones de reacción con BSA (NEBuffer 1.1, 2.1, 3.1 y CutSmart® Buffer) por tampones con albúmina recombinante (NEBuffer r1.1, r2.1, r3.1 y rCutSmart™ Buffer). También estamos en proceso de adaptar todas las formulaciones de enzimas de restricción para que contengan albúmina recombinante. Creemos que dejar de usar productos con ingredientes de origen animal es un paso en la dirección correcta y podemos ofrecer esta mejora al mismo precio.