Laboratorios biológicos de Nueva Inglaterra, R0646S, EcoP15I

Requiere dos o más sitios de escisión. Revise la lista de enzimas y las recomendaciones en las siguientes categorías relacionadas: Endonucleasas de restricción CG, Enzimas de restricción cualificadas que ahorran tiempo, Aplicaciones, Clonación rápida: Acelere sus flujos de trabajo de clonación con reactivos de NEB, Especificación de digestión con enzimas de restricción, Definición de unidad: Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para digerir 1 µg de ADN pUC19 en 1 hora a 37 °C en un volumen total de reacción de 50 μl. Condiciones de reacción 1X NEBuffer™ r3.1 Suplemento con 1X ATP Incubar a 37 °C 1X NEBuffer™ r3.1 100 mM NaCl 50 mM Tris-HCl 10 mM MgCl2 100 µg/ml Albúmina recombinante (pH 7,9 a 25 °C) Actividad en NEBuffers NEBuffer™ r1.1: 75 % NEBuffer™ r2.1: 100 % NEBuffer™ r3.1: 100 % Tampón rCutSmart™: 100 % Compatibilidad del diluyente Diluyente A Tampón de almacenamiento 10 mM Tris-HCl 100 mM NaCl 1 mM DTT 0,1 mM EDTA 200 µg/ml BSA 50 % Glicerol pH 7,4 a 25 °C Inactivación por calor 65 °C durante 20 minutos Sensibilidad a la metilación Metilación de dam: no sensible Metilación de dcm: no sensible Metilación de CpG: no sensible Preguntas frecuentes P: ¿Tengo que configurar las digestiones con enzimas calificadas Time-Saver™ durante 5 a 15 minutos? ¿Puedo digerir por más tiempo? R: Las enzimas Time-Saver™ de NEB tienen el beneficio de trabajar rápido (5-15 minutos), pero también están diseñadas y calificadas para soportar digestiones durante la noche sin degradación del ADN. P: ¿Esta enzima es sensible a la metilación de dam, dcm o CpG de mamíferos? R: No. Esta enzima no es sensible a la metilación de dam, dcm o CpG de mamíferos. Para obtener información actualizada sobre las sensibilidades a la metilación, visite Dam-Dcm y CpG Methylation o REBASE. P: ¿Podrían contarme más sobre la transición de BSA a albúmina recombinante (rAlbúmina) en los tampones NEB? R: En NEB nos complace anunciar que hemos cambiado los tampones de reacción con BSA (NEBuffer 1.1, 2.1, 3.1 y CutSmart®) por tampones con albúmina recombinante (NEBuffer r1.1, r2.1, r3.1 y rCutSmart™). También estamos en proceso de adaptar todas las formulaciones de enzimas de restricción para que contengan rAlbúmina. Creemos que dejar de usar productos de origen animal es un paso en la dirección correcta y podemos ofrecer esta mejora al mismo precio.