Laboratorios Biológicos de Nueva Inglaterra, S9151S, BG-GLA-NHS

BG-GLA-NHS es un bloque de construcción reactivo con amina para la síntesis en un solo paso de SNAP-tag Categorías relacionadas Bloques de construcción,, Sustratos de SNAP-tag,, Aplicaciones de etiquetado de proteínas Etiquetado de proteínas Snap Clip,, Especificación de imágenes celulares Condiciones de reacción Acoplamiento de BG-GLA-NHS a proteínas El acoplamiento de NHS a proteínas a menudo se realiza utilizando un exceso de éster de NHS. Dependiendo del número de residuos de lisina en la proteína, puede ser necesario detener la reacción de etiquetado antes de que se complete para evitar dañar la proteína o hacer que se despliegue. Un acoplamiento típico implica hacer reaccionar el éster de NHS con aminas primarias expuestas en la superficie de las proteínas para formar un enlace amida. La reacción se puede llevar a cabo a pH 7-9 (típicamente pH 8,3), temperaturas de 4–37 °C y tiempos de incubación que van desde 30 minutos hasta toda la noche. Se debe tener cuidado para evitar tampones que contengan aminas primarias como Tris o iones de amonio. Acoplamiento de BG-GLA-NHS a compuestos que contienen amina. Un procedimiento típico implica cantidades equimolares de éster de NHS, la amina a acoplar y trietilamina en DMF a 30 °C durante la noche. La estrategia de purificación dependerá del marcador utilizado. Se han obtenido buenos resultados tanto con HPLC como con cromatografía en gel de sílice. Preguntas frecuentes : P: Preguntas frecuentes sobre imágenes y análisis celulares. R: Ver todas las preguntas frecuentes sobre imágenes y análisis celulares.