New England Biolabs, T3018L, Monarch® ARNasa A

Monarch RNase A es un componente del Monarch Genomic DNA Purification Kit ( Categorías relacionadas ARNasas, Extracción de ADN de alto peso molecular, Análisis del epitranscriptoma, Aplicaciones Purificación de ácidos nucleicos Especificación Tampón de almacenamiento 50 mM Tris-HCl 50% Glicerol pH 7,4 Preguntas frecuentes P: ¿Puedo usar una ARNasa A diferente con el Monarch® Spin gDNA Extraction Kit? R: Siempre que la ARNasa A tenga una concentración y especificaciones de actividad similares, debería ser adecuado para su uso. Sin embargo, muchos productos de ARNasa A no tienen las mismas especificaciones de calidad que Monarch RNase A, que no tiene actividad detectable de endonucleasa, exonucleasa, ADNasa y proteasa y está libre de ADN. Estas especificaciones pueden ser relevantes para sus aplicaciones posteriores. P: ¿Puedo omitir el paso de digestión con ARNasa A del protocolo? R: Sí, el procedimiento de purificación de ADNg Monarch se ha diseñado para minimizar la cantidad de ARN que se copurifica. Porcentajes típicos de ARN Las concentraciones de ARN que se encuentran en los eluidos de ADNg Monarch cuando se omite el paso de digestión con ARNasa A son del 1 % (protocolo de sangre), del 10 % (protocolo celular) y del 1 al 5 % (protocolo de tejido). Estas bajas cantidades no suelen afectar a la mayoría de las aplicaciones posteriores. Si se incluye el paso de digestión con ARNasa A en cada protocolo, las cantidades finales de ARN que se copurifican con el ADNg son del 0 al 1 %, cantidades que no son detectables por la mayoría de los métodos. P: ¿Puedo usar Monarch® RNase A para aplicaciones/flujos de trabajo distintos a la purificación de ADNg? R: Aunque NEB no ha validado específicamente el uso de Monarch RNase A en aplicaciones distintas a la purificación de ADNg, la enzima debería funcionar bien en otras aplicaciones que utilicen ARNasa A. P: Las enzimas del kit no se almacenaron a -20 °C inmediatamente. ¿Seguirán funcionando? R: Sí, las enzimas Monarch Proteinasa K y ARNasa A sin abrir son estables a temperatura ambiente a corto plazo. Después de abrirlas, las enzimas Proteinasa K y Monarch La ARNasa A debe almacenarse a -20 °C. P: ¿Se incluye la ARNasa A Monarch con el tampón Monarch B1? R: No, el tampón Monarch B1 no se suministra con la ARNasa A Monarch. La ARNasa A Monarch (NEB n.° T3018) se puede adquirir por separado. El tampón Monarch B1 requiere la adición de ARNasa A Monarch para aplicaciones de minipreparación de plásmidos. Consulte las instrucciones de preparación del tampón correspondientes a su flujo de trabajo antes de usarlo.