Kit de extracción de ADN/ARN viral Monarch® Mag, T4010S, de New England Biolabs

El kit de extracción de ADN/ARN viral Monarch Mag permite una purificación fiable y de alto rendimiento del ácido nucleico viral mediante un protocolo basado en microesferas magnéticas. Categorías relacionadas Purificación de ácidos nucleicos basada en microesferas magnéticas Aplicaciones de purificación de ácidos nucleicos Preguntas frecuentes sobre purificación de ácidos nucleicos P: Las enzimas del kit no se almacenaron a -20 °C de inmediato. ¿Seguirán funcionando? R: Sí, las enzimas proteinasa K y ARNasa A Monarch sin abrir son estables a temperatura ambiente a corto plazo. Después de abrir, la proteinasa K y la ARNasa A Monarch deben almacenarse a -20 °C. P: ¿Cómo preparo el tampón de lavado de ADN/ARN viral? R: Prepare el tampón de lavado de ADN/ARN viral en un tubo proporcionado por el usuario combinando Monarch Buffer BX (suministrado), agua sin nucleasas (suministrada) e isopropanol (suministrado por el usuario) como se describe en el protocolo. Recomendamos que el tampón de lavado de ADN/ARN viral se prepare fresco antes de la extracción. P: ¿El kit incluye agua sin nucleasas para preparar todos los tampones de lavado? R: El agua sin nucleasas suministrada es suficiente para preparar el tampón de lavado de ADN/ARN viral. Los usuarios deben proporcionar su propia agua sin nucleasas para preparar etanol al 80 %. Para apoyar nuestros esfuerzos de sostenibilidad, no hemos incluido botellas ni agua sin nucleasas adicionales para los pasos de lavado con etanol al 80 % a fin de evitar el envío de materiales excesivos que podrían no ser aplicables a todos los usuarios. P: ¿Dónde puedo encontrar scripts de automatización? R: Para las plataformas KingFisher, cargue el script MagMAX para un mayor volumen y modifique los volúmenes en la interfaz BindIt para que coincidan con nuestro flujo de trabajo. Para otras plataformas de automatización, póngase en contacto con nuestro soporte técnico para obtener la información más reciente. P: ¿Cuál es el rango de volumen de entrada de la muestra? R: Se recomienda el flujo de trabajo estándar con un volumen de muestra de entrada de 200 µL. Se pueden utilizar volúmenes menores o mayores modificando proporcionalmente la mezcla de microesferas del tampón de lisis. Póngase en contacto con nuestro soporte técnico para obtener más ayuda. P: ¿Qué tipos de muestra son compatibles con T4010? R: El kit se ha probado con muestras de hisopos y saliva. Otras muestras, como aguas residuales y leche, se han evaluado con modificaciones del protocolo. P: ¿Qué aplicaciones posteriores son compatibles con T4010? R: RT-qPCR, ddPCR y secuenciación. P: ¿Cuál es la finalidad del ARN transportador? ¿Es necesario incluirlo en la extracción? R: Añadir ARN transportador (poli(A)) a las muestras durante el procesamiento puede mejorar la recuperación de pequeñas cantidades de ARN y ADN virales al actuar como coprecipitante. También puede reducir la probabilidad de degradación del ARN viral debido a las ARNasas al actuar como señuelo. Los usuarios pueden omitir el uso de ARN transportador; sin embargo, la recuperación de ADN y ARN virales puede verse reducida. Se debe omitir el ARN transportador si la aplicación posterior utiliza un paso de enriquecimiento con ARN poli(A). P: He utilizado toda la proteinasa K (NEB n.° P8200) incluida en el kit Monarch. ¿Puedo comprar más? R: Sí, la proteinasa K, grado de biología molecular (NEB n.° P8107), está disponible para compra independiente y se puede usar como sustituto directo de (NEB n.° P8200) en todos los protocolos Monarch sin ninguna modificación.