Kit de extracción de ADN libre de células (cfDNA) Monarch® Mag, T4070S, de New England Biolabs

Categorías relacionadas Purificación de ácidos nucleicos con perlas magnéticas, Aplicaciones de purificación de ácidos nucleicos Preguntas frecuentes sobre purificación de ácidos nucleicos P: ¿Qué tipos de muestras puedo usar con el kit de extracción de ADN libre de células Monarch® Mag (NEB n.º T4070)? R: Este kit ha sido evaluado para muestras de plasma y orina. Otras muestras biológicas, como el líquido cefalorraquídeo (LCR), también son compatibles. P: ¿Puedo agregar Monarch® StabiLyse DNA/RNA Buffer (NEB n.º T2111) al plasma y almacenarlo para una extracción posterior? R: Sí, Monarch StabiLyse DNA/RNA Buffer se puede agregar al plasma en las proporciones recomendadas en el paso de digestión de la muestra del manual del kit de extracción de ADN libre de células (cfDNA) Monarch® Mag (NEB n.º T4070), y la mezcla se puede almacenar a -20 °C o -80 °C hasta que esté lista para continuar. P: Las Monarch® Mag Beads M2 (NEB n.º T4105) se han asentado en el fondo de la botella. ¿Es esto un problema? R: Cuando no se utilizan, es normal que las perlas Monarch Mag Beads M2 se asienten rápidamente. Esto no afecta su funcionalidad. Antes de usarlas, es importante mezclarlas bien mediante agitación vigorosa en vórtex para lograr una dispersión homogénea. P: ¿Puedo comprar los componentes del kit de extracción de ADN libre de células (cfDNA) Monarch® Mag (NEB n.° T4105) por separado? R: Sí, todos los componentes de este kit también se pueden comprar por separado. Consulte la tabla de componentes del kit con enlaces a las páginas web de los respectivos productos o busque los nombres de los componentes en neb.com. P: ¿Cuál es la composición de cada reactivo incluido en el kit de extracción de ADN libre de células (cfDNA) Monarch® Mag (NEB n.° T4070)? R: Toda la información sobre la composición de los reactivos es confidencial. P: Al utilizar el kit de extracción de ADN libre de células Monarch® Mag (cfDNA) (NEB n.° T4070), en lugar de añadir Monarch Buffer BX, isopropanol y las microesferas por separado a la muestra, ¿puedo preparar una mezcla de unión de estos tres componentes? R: Sí, se puede preparar una mezcla de unión de Monarch Buffer BX, isopropanol y Monarch Mag Beads M2 para su uso en un día. Asegúrese de que esté bien mezclado antes de añadirlo al tubo de muestra. P: ¿Cuál es el volumen de elución mínimo que puedo utilizar al utilizar el kit de extracción de ADN libre de células Monarch® Mag (cfDNA) (NEB n.° T4070)? R: El volumen de elución óptimo depende del volumen de la muestra y de las microesferas magnéticas. Para una recuperación ideal, el volumen de elución debe ser la mitad del volumen de las microesferas utilizadas, aunque un volumen de elución inferior, por ejemplo, un tercio del volumen de las microesferas, también produce una buena recuperación. Otros factores a considerar al elegir el volumen del tampón de elución incluyen el contenido esperado de cfDNA en la muestra y los requisitos de entrada de la aplicación posterior. P: Al utilizar el kit de extracción de ADN libre de células (cfDNA) Monarch® Mag (NEB n.° T4070), ¿qué concentración de ADN se necesita para las aplicaciones posteriores? R: Nuestros volúmenes de elución recomendados suelen producir un resultado suficiente a la concentración necesaria para la preparación posterior de la biblioteca NGS y ayudan a eliminar la necesidad de un paso de concentración adicional después de la extracción de cfDNA. Sin embargo, si se desea una concentración mayor, se encuentra disponible un protocolo en la página web del producto. Puede producirse cierta pérdida de rendimiento con pasos de concentración adicionales. P: Al utilizar el kit de extracción de ADN libre de células (cfDNA) Monarch® Mag (NEB n.° T4070), observé que los volúmenes del tampón de lavado son los mismos independientemente del volumen de entrada de la muestra. ¿Puedo utilizar volúmenes menores de tampón de lavado con un volumen de muestra bajo? R: @font-face {font-family:"Cambria Math"; panose-1:2 4 5 3 5 4 6 3 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:roman; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:-536870145 1107305727 0 0 415 0;}@font-face {font-family:Aptos; panose-1:2 11 0 4 2 2 2 2 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:536871559 3 0 0 415 0;}@font-face {font-family:"Arial Nova"; panose-1:2 11 5 4 2 2 2 2 2 4; mso-font-charset:0; mso-generic-font-family:swiss; mso-font-pitch:variable; mso-font-signature:655 2 0 0 415 0;}p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-unhide:no; mso-style-qformat: sí; padre-estilo-mso:""; margen superior: 0 pulgadas; margen derecho: 0 pulgadas; margen inferior: 8,0 puntos; margen izquierdo: 0 pulgadas; altura de línea: 116%; mso-paginación:viuda-huérfana; tamaño de fuente: 12,0 pt; familia de fuentes: "Aptos", sans-serif; familia de fuentes-mso-ascii:Aptos; mso-ascii-theme-font:minor-latin; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-theme-font:minor-fareast; mso-hansi-font-family:Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraph, li.MsoListParagraph, div.MsoListParagraph {mso-style-priority:34; mso-style-unhide:no; mso-style-qformat:yes; margin-top:0in; margin-right:0in; margin-bottom:8.0pt; margin-left:0.5in; mso-add-space:auto; line-height:116%; mso-paginación:viuda-huérfana; tamaño de fuente: 12,0 pt; familia de fuentes: "Aptos", sans-serif; familia de fuentes-mso-ascii:Aptos; fuente-tema-mso-ascii: menor-latín; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-theme-font:minor-fareast; familia de fuentes mso-hansi: Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraphCxSpFirst, li.MsoListParagraphCxSpFirst, div.MsoListParagraphCxSpFirst {mso-style-priority:34; mso-estilo-mostrar: no; mso-style-qformat:sí; mso-style-type:solo-exportación; margen superior:0 pulg.; margen derecho:0 pulg.; margen inferior:0 pulg.; margen izquierdo:0.5 pulg.; mso-add-space:auto; altura de línea:116%; mso-pagination:widow-orphan; tamaño de fuente:12.0pt; familia de fuentes:"Aptos",sans-serif; familia de fuentes mso-ascii:Aptos; fuente de tema mso-ascii:minor-latin; familia de fuentes mso-fareast:"Times New Roman"; fuente de tema mso-fareast:minor-fareast; familia de fuentes mso-hansi:Aptos; fuente de tema mso-hansi:minor-latin; familia de fuentes mso-bidi:"Times New Roman"; fuente de tema mso-bidi:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraphCxSpMiddle, li.MsoListParagraphCxSpMiddle, div.MsoListParagraphCxSpMiddle {mso-style-priority:34; mso-estilo-mostrar: no; mso-style-qformat: sí; tipo-estilo-mso: solo exportación; margen superior: 0 pulgadas; margen derecho: 0 pulgadas; margen inferior: 0 pulgadas; margen izquierdo: 0,5 pulgadas; mso-add-space:auto; altura de línea: 116%; mso-paginación:viuda-huérfana; tamaño de fuente: 12,0 pt; familia de fuentes: "Aptos", sans-serif; familia de fuentes-mso-ascii:Aptos; fuente-tema-mso-ascii: menor-latín; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-theme-font:minor-fareast; familia de fuentes mso-hansi: Aptos; mso-hansi-theme-font:minor-latin; mso-bidi-font-family:"Times New Roman"; mso-bidi-theme-font:minor-bidi; mso-fareast-language:JA;}p.MsoListParagraphCxSpLast, li.MsoListParagraphCxSpLast, div.MsoListParagraphCxSpLast {mso-style-priority:34; mso-estilo-mostrar: no; mso-style-qformat: sí; tipo-estilo-mso: solo exportación; margen superior: 0 pulgadas; margen derecho: 0 pulgadas; margen inferior: 8,0 puntos; margen izquierdo: 0,5 pulgadas; mso-add-space:auto; altura de línea: 116%; mso-paginación:viuda-huérfana; tamaño de fuente: 12.0pt; familia de fuentes: "Aptos", sans-serif; familia de fuentes mso-ascii: Aptos; fuente con tema mso-ascii: minor-latin; familia de fuentes mso-fareast: "Times New Roman"; fuente con tema mso-fareast: minor-fareast; familia de fuentes mso-hansi: Aptos; fuente con tema mso-hansi: minor-latin; familia de fuentes mso-bidi: "Times New Roman"; fuente con tema mso-bidi: minor-bidi; idioma mso-fareast: JA;}.MsoChpDefault {tipo de estilo mso: solo exportación; propiedades predeterminadas mso: sí; familia de fuentes: "Aptos", sans-serif; familia de fuentes mso-ascii: Aptos; Para entradas de muestra de 2 ml y 4 ml, recomendamos volúmenes de lavado de 1 ml. Para entradas de muestra inferiores a 1 ml, se puede usar un volumen reducido de los lavados si se desea, por ejemplo, 500-700 µl. P: Estoy interesado en la extracción de ARNcf. ¿Puedo usar el kit de extracción de ADN libre de células (ADNcf) Monarch® Mag (NEB n.° T4070) para la extracción de ARNcf? R: Los reactivos y el flujo de trabajo que se incluyen con el kit de extracción de ADN libre de células (ADNcf) Monarch Mag están optimizados para la extracción de ADN libre de células. Para consultas sobre otras aplicaciones, como la extracción de ARNcf, por favor, dirija el soporte técnico de NEB. P: He usado toda la proteinasa K (NEB n.° P8200) incluida en el kit Monarch. ¿Puedo comprar más? R: Sí, la proteinasa K, grado de biología molecular (NEB n.° P8107), está disponible para su compra independiente y se puede usar como sustituto directo de (NEB n.° P8200) en todos los protocolos Monarch sin ninguna modificación.