Promega, AX5810, Sistema anidado PowerSeq® CRM, personalizado

Producir bibliotecas MPS listas para el análisis de la región de control mitocondrial
Secuenciación masiva paralela de las regiones de control mitocondriales HVI, HVII y HVIII en una sola reacción
El protocolo de amplificación anidada reduce en gran medida la cantidad de pasos y el tiempo necesarios para la preparación de la biblioteca.
Amplicones pequeños que van desde 144 a 237 pb para obtener mejores resultados con muestras comprometidas
Presupuesto:
Mezcla de pares de cebadores anidados PowerSeq® CRM 10X AX579A 1 × 250 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D701 AX580A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D702 AX582A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D703 AX583A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D704 AX584A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D705 AX585A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D706 AX586A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D707 AX587A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D708 AX588A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D709 AX589A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 1 D710 AX590A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D711 AX591A 1 × 75 μl
Cebador de índice del sistema anidado PowerSeq® 1 D712 AX592A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D501 AX593A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D502 AX594A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D503 AX595A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D504 AX596A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D505 AX597A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D506 AX598A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D507 AX599A 1 × 75 μl
Cebador de índice de sistema anidado PowerSeq® 2 D508 AX600A 1 × 75 μl
Mezcla maestra PowerSeq® 5X DP116A 1 × 500 μl
La secuenciación masiva paralela (MPS) permite a los laboratorios acceder al análisis de ADN mitocondrial (ADNmt) mediante un flujo de trabajo más sensible y de alto rendimiento en comparación con los métodos de secuenciación tradicionales. La deconvolución de la mezcla y la resolución de la heteroplasmia se consiguen mediante una cobertura de secuenciación profunda y el recuento de lecturas digitales. Además, el uso de amplicones pequeños para secuenciar la región de control mitocondrial mejora los resultados de la secuenciación en muestras degradadas.
El sistema anidado PowerSeq® CRM, personalizado, genera 10 amplicones pequeños que cubren la región de control del genoma mitocondrial en un multiplex. Las regiones diana para la amplificación están diseñadas para estar en un rango de 144 a 237 pb para garantizar resultados óptimos a partir de muestras degradadas. El sistema utiliza un protocolo de amplificación anidada que reduce considerablemente el número de pasos y el tiempo necesarios para producir bibliotecas listas para la secuenciación. El protocolo consta de un solo paso de PCR para amplificar los amplicones diana e incorporar adaptadores de secuenciación indexados.
Los datos de secuenciación se pueden analizar utilizando
Software GeneMarker HTS
(SoftGenetics, LLC).