Promega, GA6040, bioensayo de bloqueo de SIRPα/CD47

Medir la potencia y estabilidad de los productos biológicos que se unen y bloquean las interacciones SIRPα/CD47
Precalificado según las directrices ICH
Formatos de placas de 96 y 384 pocillos
No se requiere cultivo celular primario
Se suministra en un cómodo formato para descongelar y usar; también disponible en formato de modelo de propagación celular (CPM)
Presupuesto:
Células efectoras SIRPα GA131A 1 × 0,5 ml
Células diana CD47/FcγR-A CHO-K1 GA125A 1 × 0,5 ml
Suero fetal bovino J121A 1 × 4 ml
Medio Ham's F-12 J123A 1 × 25 ml
RPMI 1640 Medio G708A 1 × 36 ml
Tampón de ensayo de luciferasa Bio-Glo-NL™ J308A 1 × 10 ml
Sustrato de ensayo de luciferasa Bio-Glo-NL™ J309A 1 × 200 μl
Células efectoras SIRPα GA131A 5 × 0,5 ml
Células diana CD47/FcγR-A CHO-K1 GA125A 5 × 0,5 ml
Suero fetal bovino J121A 5 × 4 ml
Medio F-12 de Ham J123A 5 × 25 ml
RPMI 1640 Medio G708A 5 × 36 ml
Tampón de ensayo de luciferasa Bio-Glo-NL™ J308A 5 × 10 ml
Sustrato de ensayo de luciferasa Bio-Glo-NL™ J309A 5 × 200 μl
Células diana CD47/FcγR-A CHO-K1 (CPM) GA120A 2 × 1 ml
Células efectoras SIRPα (CPM) GA129A 2 × 1 ml
Células efectoras SIRPα (CPM) GA129A 50 × 1 ml
Células diana CD47/FcγR-A CHO-K1 (CPM) GA120A 50 × 1 ml
Control Ab, Anti-SIRPα K125A 1 × 50 μg
La fagocitosis celular dependiente de anticuerpos (ADCP) es un mecanismo de acción (MOA) importante para las inmunoterapias basadas en anticuerpos. La ADCP está regulada por una compleja red de puntos de control, como SIRPα y CD47, que facilitan la eliminación de células aberrantes o infectadas, preservando al mismo tiempo los tejidos sanos. A pesar de su importante función fisiológica, el punto de control SIRPα/CD47 contribuye al escape inmunitario de las células tumorales, muchas de las cuales sobreexpresan CD47 y, por lo tanto, evaden la fagocitosis. Los fármacos biológicos que inhiben la interacción SIRPα/CD47 mejoran la fagocitosis de las células tumorales in vitro y han demostrado una eficacia terapéutica prometedora.
Los métodos actuales para evaluar la actividad de los inhibidores del punto de control SIRPα/CD47 se basan en macrófagos primarios derivados de monocitos y en la medición directa de la fagocitosis. Estos ensayos son laboriosos y muy variables debido a su dependencia de células donantes, protocolos de ensayo complejos y reactivos no cualificados. Por consiguiente, son difíciles de implementar en un entorno de control de calidad.
El bioensayo de bloqueo de SIRPα/CD47 es un ensayo bioluminiscente basado en células reporteras que se utiliza para medir la potencia y la estabilidad de ligandos y anticuerpos Fc-silenciados o Fc-nulos que se unen y bloquean las interacciones de SIRPα y CD47. Para inhibidores Fc-funcionales, recomendamos el bioensayo de bloqueo de SIRPα/CD47 dependiente de Fc.