Promega, ND2690, kit de inicio de ubiquitinación NanoBRET®

Ensayo basado en BRET de células vivas para medir la ubiquitinación de proteínas
Ensayo de ubiquitinación general para medir los cambios en el nivel relativo de ubiquitinación de la proteína objetivo
Realizar análisis cinéticos de punto final o de células vivas para determinar la dinámica de ubiquitinación de proteínas.
Ensayo de ubiquitinación en proteínas expresadas ectópicamente o endógenamente
Presupuesto:
Ligando HaloTag® NanoBRET® 618 G980A 1 × 20 μl
pNLF1-N [CMV/Hygro] Vector N135A 1 × 20 μg
pNLF1-C [CMV/Hygro] Vector N136A 1 × 20 μg
Sustrato NanoBRET® Nano-Glo® N157A 1 × 50μl
NanoLuc®-BRD4 FL Vector de fusión N169A 1 × 20 μg
Vector de fusión HaloTag®-Ubiquitina N272A 1 × 20 μg
La regulación de la homeostasis proteica celular es fundamental para mantener la salud celular y, a menudo, se ve alterada por tratamientos celulares o enfermedades. La mayoría de las proteínas y su abundancia se regulan mediante el sistema ubiquitina-proteasoma (SUP), que utiliza la conjugación de la ubiquitina para indicar a las proteínas que se distribuyan al proteasoma para su degradación. La ubiquitinación en cualquier diana puede variar en niveles, monoubiquitinación y poliubiquitinación, y está mediada por diversos enlaces de aminoácidos.
El Kit de Inicio de Ubiquitinación NanoBRET® proporciona las herramientas para crear ensayos de ubiquitinación en células vivas específicos para cada diana, que miden globalmente todos los tipos de ubiquitinación en una proteína diana. Los ensayos pueden utilizarse para medir aumentos o disminuciones dinámicas en los niveles relativos de ubiquitinación de la proteína diana tras tratamientos celulares, como moléculas pequeñas o inductores de vías, que influirían en la estabilización o degradación de proteínas, respectivamente. Estos ensayos pueden ser especialmente útiles para estudiar compuestos de degradación específicos, ya que la relación de transferencia de energía por resonancia bioluminiscente de la señal NanoBRET™® permite investigar la ubiquitinación de proteínas a la vez que se monitorizan los niveles de la proteína diana para evaluar la degradación.