Promega, NP4050, NanoBRET® Sistema de selectividad de quinasa K192 con compromiso de objetivo

Selectividad del perfil en un panel diverso de quinasas en células vivas
Perfil de selectividad celular compuesta contra un panel de 192 quinasas humanas, que representan ampliamente el cinoma
El protocolo celular optimizado, de solo adición, proporciona datos cuantitativos de ocupación de compuestos para 192 quinasas de longitud completa en un solo experimento.
El sistema K192 proporciona el panel de vectores de quinasa K192 listo para transfección y un único ensayo de quinasa NanoBRET® TE.
Presupuesto:
NanoBRET® Nano-Glo® Sustrato N157D 1 × 3,3 ml
Tampón de dilución trazador N219B 1 × 50 ml
Inhibidor extracelular NanoLuc® N235C 1 × 1,1 ml
Trazador NanoBRET® K-10 N264B 10 × 300 μl
Placa vectorial NanoBRET® TE K192 A NP401A 2 × 1 cada una
NanoBRET® TE K192 Placa vectorial B NP402A 2 × 1 cada una
Sellos de placa de lámina adhesiva NP4000 1 × 1 cada uno
NanoBRET® Nano-Glo® Sustrato N157D 1 × 3,3 ml
Tampón de dilución trazador N219B 1 × 50 ml
Inhibidor extracelular NanoLuc® N235C 1 × 1,1 ml
Trazador NanoBRET® K-10 N264B 10 × 300 μl
ADN portador de transfección E488B 1 × 100 μg
pNL1.1.CMV[ N109A 1 × 20 μg
Vector de fusión NanoLuc®-HIPK2 NV322A 1 × 20 μg
Placa vectorial NanoBRET® TE K192 A NP401A 2 × 1 cada una
NanoBRET® TE K192 Placa vectorial B NP402A 2 × 1 cada una
Sellos de placa de lámina adhesiva NP4000 1 × 1 cada uno
Placa vectorial NanoBRET® TE K192 A NP401A 2 × 1 cada una
NanoBRET® TE K192 Placa vectorial B NP402A 2 × 1 cada una
Sellos de placa de lámina adhesiva NP4000 1 × 1 cada uno
Placa vectorial NanoBRET® TE K192 A NP401A 1 × 1 cada una
NanoBRET® TE K192 Placa vectorial B NP402A 1 × 1 cada una
Sellos de placa de lámina adhesiva NP4000 1 × 1 cada uno
El sistema de selectividad de quinasas NanoBRET® Target Engagement (TE) K192 puede medir cuantitativamente la ocupación intracelular de compuestos frente a un panel de 192 quinasas en un solo experimento. El sistema se basa en
Tecnología NanoBRET® TE
, un método de transferencia de energía por resonancia de bioluminiscencia (BRET) que utiliza la luciferasa NanoLuc®, pequeña y extremadamente brillante, como donante de energía y un trazador NanoBRET® TE permeable a las células como aceptor de energía. El Sistema de Selectividad de Quinasas K192 es un método de células vivas que utiliza un formato de placa multipocillo de solo adición con un único ensayo de quinasas NanoBRET® TE. El Sistema de Selectividad de Quinasas NanoBRET® TE K192 está optimizado para cada quinasa para proporcionar datos cuantitativos de ocupación, lo que permite el perfilado celular de las interacciones compuesto-quinasa.
El Dr. Martin Matzuk explica la importancia de NanoBRET® TE en su investigación.
Vea cómo el sistema de selectividad de quinasas NanoBRET® TE K192 se ha optimizado para un formato de placa de 384 pocillos, lo que permite un mayor rendimiento y una detección de compuestos más eficiente por kit.
La publicación Cell Chemical Biology es la demostración original de cómo NanoBRET® TE podría utilizarse para la determinación de perfiles de selectividad de quinasas en células vivas. Esta publicación ilustra el primer método en células vivas que determina cuantitativamente la ocupación de compuestos frente a cientos de quinasas.
La publicación de los Protocolos STAR mejora el trabajo de Biología Química Celular y sienta las bases del Sistema de Selectividad de Quinasas NanoBRET® TE K192. Los autores muestran cómo un único Ensayo de Quinasas NanoBRET® TE puede utilizarse para perfilar la interacción de compuestos en 192 quinasas de longitud completa en un único experimento con células vivas mediante un flujo de trabajo sencillo.