Promega, V7991, Ensayo de desmetilasa/hidroxilasa Succinate-Glo™ JmjC

Detección bioluminiscente sensible de la actividad de la desmetilasa
Formato de ensayo fácil de usar para agregar y leer
El ensayo universal se puede utilizar con cualquier enzima productora de succinato.
Optimizado para aplicaciones de detección; bajos niveles de falsos positivos
Presupuesto:
Succinato, 10 mM V897A 1 × 50 μl
Tampón Succinate-Glo™ V847A 1 × 5 ml
Solución Succinate-Glo™ V894A 1 × 50 μl
Tampón de detección de ATP V895A 1 × 10 ml
Acetoacetil-CoA, 100X V896A 1 × 100 μl
Sustrato de detección de ATP V898A 1 × 1 vial
Succinato, 10 mM V897A 1 × 50 μl
Tampón Succinate-Glo™ V847B 1 × 50 ml
Solución Succinate-Glo™ V894B 1 × 500 μl
Tampón de detección de ATP V895B 1 × 100 ml
Acetoacetil-CoA, 100X V896B 1 × 1 ml
Sustrato de detección de ATP V898B 1 × 1 vial
Las histonas lisina desmetilasas (JMJC) que contienen el dominio JumonjiC desempeñan un papel fundamental en la determinación del estado epigenético del genoma, contrarrestando la actividad de las histonas lisina metiltransferasas. Estas enzimas actúan como borradores catalizando la eliminación de marcas de metilo de sitios específicos de lisina en las histonas, lo que provoca la represión transcripcional o la activación de genes diana.
El ensayo Succinate-Glo™ JmjC Desmetilasa/Hidroxilasa detecta rápidamente la formación de succinato en las reacciones de la histona desmetilasa JumonjiC y la dioxigenasa dependiente de Fe(II)/α-cetoglutarato. El ensayo utiliza el producto de reacción, succinato, para formar ATP, lo que impulsa una reacción bioluminiscente que produce una señal proporcional a la actividad original de la desmetilasa/hidroxilasa.