Qiagen, 10262, punta genómica QIAGEN 500/G

10 columnas

Características

- El cizallamiento mecánico mínimo permite el aislamiento de ADN de alto peso molecular de hasta 150 kb de tamaño.
- Sin extracciones con fenol o cloroformo
- Procesamiento paralelo y conveniente de múltiples muestras

Detalles del producto

Las puntas genómicas QIAGEN son puntas de intercambio aniónico con flujo por gravedad que permiten la purificación eficiente del ADN genómico de una amplia gama de muestras biológicas. El ADN purificado tiene un tamaño de hasta 150 kb, con un tamaño promedio de 50-100 kb.

Actuación

Fuente de muestra: Cantidad
Punta genómica 20/G: Punta genómica 100/G
Sangre entera (humana): 1 ml
Células cultivadas (HeLa): 5 x 10 6
Tejido (hígado): 15 mg
Levadura (S. cerevisiae): 1 ml
Bacterias Gram-positivas (E. coli): 0,6–1,2 ml
Bacterias Gram+ (B. subtilis): 1,2–1,8 ml

El procedimiento QIAGEN Genomic-tip es muy suave y produce una fragmentación mínima del ADN. El ADN purificado con QIAGEN Genomic-tips alcanza un tamaño de hasta 150 kb, con una longitud promedio de 50 a 100 kb (véase la figura "ADN genómico de hasta 150 kb"). El ADN está libre de contaminantes como ARN, proteínas y metabolitos, y presenta una relación A₂₄/A₂₄ de entre 1,7 y 1,9.

Las puntas genómicas QIAGEN están disponibles en diversos tamaños para adaptarse a cualquier necesidad de preparación y se suministran con un manual completo con protocolos detallados para la preparación de ADN genómico a partir de cada tipo de muestra. El kit de tampones de ADN genómico, que se puede adquirir por separado, incluye tampones de lisis específicos para sangre, tejido, células cultivadas, levaduras y bacterias, así como todos los demás tampones necesarios.

El ADN purificado se ha utilizado en la secuenciación directa del genoma bacteriano (ver figura "Secuenciación directa del ADN genómico bacteriano").

Especificaciones de la punta genómica de QIAGEN

Principio

Las puntas genómicas QIAGEN utilizan la exclusiva tecnología de intercambio aniónico de QIAGEN para el aislamiento de ADN de alto peso molecular de una amplia gama de muestras biológicas sin fenol ni cloroformo. Los tampones de lisis están optimizados para diferentes tipos de muestras y proporcionan la desnaturalización inmediata de proteínas como nucleasas, histonas y proteínas de unión al ADN, así como de partículas virales potencialmente infecciosas. En las condiciones de pH y baja salinidad que proporciona el tampón, el ADN se une a la resina QIAGEN en la columna. Al mismo tiempo, otros componentes celulares, como proteínas, carbohidratos y metabolitos, fluyen a través de la columna. El ADN purificado se eluye en un tampón de alta salinidad. Las puntas genómicas funcionan por gravedad y pueden dejarse sin supervisión sin que se sequen. Esto reduce al mínimo el tiempo de manipulación y hace que el procedimiento sea ideal para el procesamiento simultáneo de múltiples muestras.

Procedimiento

Las muestras se lisan primero (las muestras de tejido se rompen mecánicamente) y simultáneamente se desnaturalizan las proteínas en el tampón de lisis adecuado (véase el diagrama de flujo "Procedimiento de QIAGEN Genomic-tip"). A continuación, se añade la proteasa o proteinasa K de QIAGEN y, tras un periodo de incubación adecuado, se cargan los lisados ​​en la QIAGEN Genomic-tip. El ADN se une a la columna mientras que otros componentes celulares la atraviesan. Tras un lavado para eliminar cualquier contaminante restante, el ADN puro de alto peso molecular se eluye y se precipita con isopropanol. El tiempo de intervención para el procedimiento completo es de tan solo 20 minutos para bacterias, 30 minutos para sangre y células cultivadas, y 40 minutos para tejido y levaduras.

Aplicaciones

- Secuenciación de próxima generación y secuenciación de lectura larga
- Análisis RFLP
- Análisis de la focalización genética
- Cribado de animales transgénicos
- Estudios de huellas dactilares de ADN
- Southern blotting

El ADN purificado con puntas genómicas QIAGEN es adecuado para su uso en las siguientes aplicaciones: