Qiagen, 1070498, tampón TCL, 2x (8,5 ml)

8,5 ml de tampón de lisis 2x para kits de ARNm TurboCapture

Características

- Purificación de ARNm basada en placas en formato de 96 o 384 pocillos
- Pocos pasos de protocolo y tiempo mínimo de intervención.
- Purificación de ARNm y síntesis de ADNc en el mismo pocillo
- Placas estándar compatibles con estaciones de trabajo robóticas

Detalles del producto

El sistema TurboCapture utiliza una tecnología única de inmovilización de oligonucleótidos para ofrecer un procedimiento rápido y sencillo para la extracción de ARNm de alto rendimiento. Los lisados ​​celulares se añaden a los pocillos de una placa TurboCapture (de 96 o 384 pocillos) y se deja que el ARNm se hibride con el oligo-dT inmovilizado en cada pocillo. Los contaminantes se eliminan por lavado y el ARNm aislado se utiliza directamente en la síntesis de ADNc o se eluye para su uso en aplicaciones posteriores.

Actuación

Los kits de ARNm TurboCapture permiten una purificación rápida y sencilla de ARNm a partir de células cultivadas, incluyendo células adherentes y en suspensión (véase la figura "Purificación de ARNm a partir de células en suspensión"). Gracias a los formatos de placa estándar y a los flujos de trabajo sencillos, los kits de ARNm TurboCapture pueden automatizarse, lo que permite realizar la purificación de ARNm, la síntesis de ADNc y la PCR en el mismo pocillo. Esto evita la necesidad de transferir muestras y garantiza una alta reproducibilidad entre pocillos (véase la figura "Alta reproducibilidad entre pocillos"). Al utilizar oligo-dT inmovilizado en el pocillo como cebador, el ADNc sintetizado se une covalentemente al pocillo y puede reutilizarse varias veces (véase la figura "Análisis de PCR secuencial"). Los kits son ideales para aplicaciones de análisis de expresión génica de alto rendimiento, como el cribado de ARNip mediante RT-PCR en tiempo real (véase la figura "Análisis paralelo de ARNip"). Los kits de ARNm TurboCapture también proporcionan una alta sensibilidad en el análisis de la expresión genética, lo que permite la detección de objetivos a partir de una sola célula (consulte la figura "Análisis de la expresión genética").

Principio

La extracción rápida y rentable de ARNm en placa, tanto de células adherentes como de células en suspensión, así como de ARN total, se logra con un tiempo mínimo de manipulación gracias a la exclusiva tecnología de inmovilización de oligonucleótidos de los kits de ARNm TurboCapture. Estos kits permiten purificar el ARNm mediante hibridación con oligo-dT inmovilizado en cada pocillo de una placa de 96 o 384 pocillos. El oligo-dT inmovilizado en el pocillo puede utilizarse como cebador para sintetizar ADNc mientras el ARNm permanece hibridado, obteniendo ADNc unido covalentemente al pocillo. Las placas TurboCapture son compatibles con la mayoría de los termocicladores, lo que permite que la hibridación del ARNm y la posterior síntesis de ADNc y PCR se realicen en la misma placa, minimizando la manipulación de las muestras y reduciendo los costes de consumibles. El procedimiento puede automatizarse en instrumentos robóticos gracias a los formatos de placa estándar y a la simplicidad de los flujos de trabajo.

Procedimiento

Con los kits de ARNm TurboCapture, se puede purificar ARNm a partir de ARN total, así como de diversos tipos celulares, incluyendo células adherentes y en suspensión. (Si se purifica ARNm a partir de células en suspensión, también se debe adquirir el tampón TCL 2x [n.° de cat. 1031586]). Simplemente añada los lisados ​​de muestra a los pocillos de una placa TurboCapture (96 o 384 pocillos). Deje que el ARNm se hibride con el oligo-dT inmovilizado en cada pocillo y elimine los contaminantes. El ARNm aislado puede utilizarse directamente en la síntesis de ADNc o, alternativamente, puede eluirse para su uso en aplicaciones posteriores (véase el diagrama de flujo "Procedimiento de ARNm de TurboCapture"). El oligo-dT inmovilizado en el pocillo puede utilizarse como cebador para el ADNc, que se unirá covalentemente al pocillo y podrá reutilizarse. Alternativamente, se pueden utilizar cebadores oligo-dT solubles o hexámeros aleatorios para preparar ADNc soluble (ver figura "Purificación de ARNm y síntesis de ADNc en el mismo pocillo").

Aplicaciones

- RT-PCR en tiempo real
- RT-PCR cuantitativa en tiempo real
- Cribado de siRNAs mediante RT-PCR en tiempo real

Los kits de ARNm TurboCapture son ideales para aplicaciones de análisis de expresión genética de alto rendimiento como:

Los kits de ARNm TurboCapture están diseñados para aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están destinados al diagnóstico, la prevención ni el tratamiento de enfermedades.