Qiagen, 11910, juego de tampones ultrapuros 100

Tampones P1, P2, P3, QBT, QC, QN, ER, TE, agua libre de endotoxinas, ARNasa A; para la preparación de hasta 100 mg de ADN plasmídico

Características

- Purificación de ADN plasmídico <0,1 EU/µg
- Purificación de ADN plasmídico ultrapuro hasta 100 mg

Detalles del producto

El juego de tampones Ultrapure 100 es un conjunto de tampones para usar con la resina Ultrapure 500. Se purifican de forma fácil y eficiente hasta 100 mg de ADN plasmídico libre de endotoxinas (<0,1 UE/µg de ADN). El sistema utiliza la tecnología de intercambio aniónico de QIAGEN con eliminación integrada de endotoxinas para obtener ADN ultrapuro.

Actuación

El juego de tampones Ultrapure 100 proporciona tampones que están certificados para contener <10 EU/ml (según lo determinado por BioWhittaker Kinetic-QCLTest) para usar con la resina.

Principio

El nivel de contaminación por endotoxinas en el ADN plasmídico purificado depende del método de purificación utilizado. El ADN purificado con sílice en suspensión presenta niveles extremadamente altos de endotoxinas. Los kits QIAGEN, QIAfilter y HiSpeed ​​Plasmid, así como la ultracentrifugación con CsCl 2x, producen ADN muy puro con niveles relativamente bajos de endotoxinas. El sistema QIAGEN Ultrapure 100 incluye un paso integrado de eliminación de endotoxinas para obtener ADN plasmídico con <0,1 UE/µg.

Las endotoxinas, también conocidas como lipopolisacáridos o LPS, son componentes de la membrana celular de bacterias gramnegativas como E. coli (véase la figura "Pared celular bacteriana"). Se liberan durante la lisis de la purificación de plásmidos y reducen significativamente la eficiencia de la transfección en líneas celulares sensibles a las endotoxinas. Además, pueden influir en la captación de ADN plasmídico en experimentos de transfección al competir con el ADN por el reactivo de transfección "libre". También inducen la activación inespecífica de respuestas inmunitarias en células inmunitarias como macrófagos y linfocitos B, lo que puede dar lugar a una interpretación errónea de los resultados de la transfección. Estas respuestas incluyen la síntesis inducida de proteínas y lípidos como IL-1 y prostaglandina. En general, las endotoxinas representan una variable no controlable en la configuración de los experimentos de transfección, lo que influye en el resultado y la reproducibilidad de los resultados, dificultando su comparación e interpretación. En la investigación de la terapia genética, las endotoxinas pueden interferir provocando el síndrome de shock endotóxico y la activación de la cascada del complemento.

Aplicaciones

- Silenciamiento génico mediado por plásmidos
- Transfección
- Investigación en terapia genética

El juego de tampones Ultrapure 100 con la resina Ultrapure 500 produce ADN plasmídico con una pureza al menos equivalente a la obtenida tras una centrifugación en gradiente de CsCl 2x. El sencillo paso de eliminación de endotoxinas garantiza que el ADN purificado contenga <0,1 UE/µg de ADN. Por lo tanto, el ADN es adecuado para aplicaciones sensibles, como: