Qiagen, 12262, Kit Maxi de plásmidos QIAfilter (10)

10 puntas QIAGEN 500, reactivos, tampones, 10 cartuchos QIAfilter Maxi

Características

- Aclaramiento de lisados ​​sin centrifugación
- Tiempo de purificación de plásmidos reducido
- Altos rendimientos de ADN plasmídico
- Reactivo LyseBlue para una lisis óptima y un rendimiento máximo de ADN

Detalles del producto

Los kits de plásmidos QIAfilter permiten la purificación de plásmidos mediante intercambio aniónico, con aclaramiento del lisado bacteriano por filtración. El ADN purificado es equivalente al obtenido mediante centrifugación en gradiente de CsCl 2x y es apto para aplicaciones de transfección.

El kit QIAfilter Plasmid Mega (n.° de cat. 12281) y el kit QIAfilter Plasmid Giga (n.° de cat. 12291) dejarán de fabricarse el 30 de junio de 2021. Seguirán disponibles hasta agotar existencias. El kit QIAGEN Plasmid Mega (n.° de cat. 12181) y el kit QIAGEN Plasmid Giga (n.° de cat. 12191) pueden utilizarse con los cartuchos QIAfilter Mega-Giga (n.° de cat. 19781) como paso opcional del protocolo para la rápida purificación de lisados ​​bacterianos mediante filtración en lugar de centrifugación. Visite la página web de kits de plásmidos QIAGEN para obtener más información.

Actuación

Los kits de plásmidos QIAfilter combinan cartuchos QIAfilter para una rápida purificación de lisados ​​bacterianos mediante filtración en lugar de centrifugación, con puntas QIAGEN de eficacia probada que contienen resina de intercambio aniónico para una purificación eficiente de plásmidos. Se obtienen rendimientos de hasta 500 µg (máximo) y 100 µg (mínimo) de ADN plasmídico de alta copia y grado de transfección a partir del cultivo (el volumen de cultivo depende del número de copias del plásmido, el tamaño del inserto, la cepa huésped y el medio de cultivo).

Principio

Características: Kit QIAfilter Plasmid Maxi
Aplicaciones: Transfección, clonación, secuenciación, etc.
Volumen de cultivo/material de partida: 100–250 ml de volumen de cultivo
Tipo de plásmido: ADN cósmido de alto número de copias, de bajo número de copias
Procesamiento: Manual (filtración)
Muestra por ejecución: 1 muestra por ejecución
Tecnología: Tecnología de intercambio aniónico
Tiempo por carrera: 120 min
Rendimiento: <500 µg

Los cartuchos QIAfilter, incluidos en los kits de plásmidos QIAfilter, HiSpeed ​​y EndoFree, son unidades de filtración especiales diseñadas para sustituir la centrifugación tras la lisis alcalina de células bacterianas. Los cartuchos QIAfilter eliminan completamente los precipitados de SDS y purifican los lisados ​​bacterianos en una fracción del tiempo necesario para la centrifugación, lo que reduce el tiempo de purificación de plásmidos hasta en una hora.

Como paso opcional del protocolo para la clarificación rápida de lisados ​​bacterianos mediante filtración en lugar de centrifugación, puede utilizar los cartuchos QIAfilter Mega-Giga (n.º de cat. 19781) con el kit QIAGEN Plasmid Mega (n.º de cat. 12181) y el kit QIAGEN Plasmid Giga (n.º de cat. 12191). Visite la página web de kits de plásmidos de QIAGEN para obtener más información. Los cartuchos QIAfilter Maxi y Midi utilizan un formato de jeringa y los lisados ​​se clarifican rápidamente al empujar el líquido a través del filtro.

La exclusiva resina de intercambio aniónico de las puntas QIAGEN se desarrolló exclusivamente para la purificación de ácidos nucleicos. Sus excepcionales propiedades de separación dan como resultado una pureza del ADN equivalente o superior a la obtenida mediante dos rondas sucesivas de centrifugación en gradiente de CsCl. Las puntas QIAGEN preempaquetadas funcionan por gravedad y nunca se secan, lo que minimiza el tiempo de preparación de plásmidos. Todo el sistema de purificación de plásmidos QIAGEN evita el uso de sustancias tóxicas como fenol, cloroformo, bromuro de etidio y CsCl, minimizando así los riesgos para el usuario y el medio ambiente.

Procedimiento

Los lisados ​​bacterianos neutralizados se incuban directamente en el cartucho QIAfilter y se clarifican rápidamente por filtración. El lisado clarificado se carga en la punta de intercambio aniónico, donde el ADN plasmídico se une selectivamente en condiciones adecuadas de baja salinidad y pH. El ARN, las proteínas, los metabolitos y otras impurezas de bajo peso molecular se eliminan mediante un lavado con sal media, y el ADN plasmídico ultrapuro se eluye en un tampón con alta salinidad (véase el diagrama de flujo "Procedimientos del kit de plásmidos QIAGEN"). El ADN se concentra y desaliniza mediante precipitación con isopropanol y se recoge por centrifugación.

Aplicaciones

El ADN obtenido con los kits de plásmidos QIAfilter proporciona excelentes resultados en todas las aplicaciones, desde la clonación hasta la transfección.