Qiagen, 12943, Kit QIAGEN Plasmid Plus Midi (25)

25 columnas QIAGEN Plasmid Plus Midi, tubos extensores, reactivos, tampones, 25 cartuchos QIAfilter Midi

Características

- Purificación rápida de hasta 24 muestras
- Procesamiento paralelo rápido basado en vacío
- Volúmenes de elución bajos para ADN altamente concentrado
- Niveles muy bajos de endotoxinas (<1 EU/μg) gracias al tampón de lavado específico

Detalles del producto

Los kits QIAGEN Plasmid Plus permiten la purificación ultrarrápida a gran escala de hasta 10 mg de ADN plasmídico de alta pureza. El uso de un colector de vacío permite la purificación de hasta 24 muestras en paralelo, lo que reduce el tiempo de manipulación. Los bajos volúmenes de elución producen ADN plasmídico altamente concentrado para uso directo sin precipitación con etanol. Los kits QIAGEN Plasmid Plus también incluyen un tampón de lavado específico para la reducción de endotoxinas. El ADN plasmídico obtenido es ideal para diversas aplicaciones, incluida la transfección en líneas celulares sensibles.

Para obtener resultados óptimos se recomienda utilizar este producto junto con QIAvac 24 Plus.

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Actuación

Calidad y rendimiento constantes

La tecnología QIAGEN Plasmid Plus ofrece el mismo rendimiento y calidad que la tecnología de intercambio aniónico. La química de unión única de las columnas QIAGEN Plasmid Plus garantiza la obtención de ADN plasmídico puro en todo momento. Los kits QIAGEN Plasmid Plus incluyen protocolos de alto rendimiento y volúmenes de tampón adicionales. Se obtienen rendimientos de hasta 10 mg (giga), 2 mg (mega), 1 mg (maxi) y 250 μg (midi) de ADN plasmídico de alta pureza, libre de contaminantes como ARN, proteínas y ADN genómico (véanse las figuras «Altos rendimientos garantizados con los kits QIAGEN Plasmid Plus (QPP)» y «Cromatograma analítico»).

ADN plasmídico de grado de transfección con niveles muy bajos de endotoxinas

Las endotoxinas, también conocidas como lipopolisacáridos o LPS, son componentes de la membrana celular de bacterias gramnegativas como E. coli y se liberan durante la lisis de la purificación de plásmidos. Pueden inducir una activación inespecífica de la respuesta inmunitaria y, por lo tanto, representan una variable no controlable en la configuración de los experimentos de transfección, lo que influye en el resultado y la reproducibilidad de los resultados, dificultando su comparación e interpretación.

El tampón de lavado de endotoxinas incluido en los kits reduce las endotoxinas bacterianas a niveles generalmente inferiores a 1 UE/μg de ADN. (Los niveles de endotoxinas pueden variar según la cepa huésped, el medio de cultivo y la densidad celular. Si la densidad celular es muy alta, los niveles de endotoxinas pueden ser ligeramente superiores, entre 1 y 3 UE/μg de ADN). Esto hace que el ADN plasmídico sea adecuado para diversas aplicaciones, incluida la transfección en líneas celulares sensibles (véanse las figuras "Niveles de endotoxinas con los kits QIAGEN Plasmid Plus", "Niveles de endotoxinas con diferentes métodos de aislamiento" y "Transfección eficiente en líneas celulares sensibles").

Principio

Características: Plasmid Plus Giga Kit
Aplicaciones: Transfección de la mayoría de líneas celulares, clonación, restricción enzimática, traducción/transcripción in vitro, secuenciación.
Volumen de cultivo/material de partida: 2500 ml de volumen de cultivo
Concentración final de ADN: ≥1 µg/µl
Tipo de plásmido: Plásmidos, cósmidos
Procesamiento: Manual (centrifugación y vacío), procesamiento paralelo
Muestras por ejecución; rendimiento: 1–12 muestras por ejecución
Tecnología: Tecnología avanzada de sílice (no caotrófica), reducción de endotoxinas
Tiempo por carrera: 50 min
Rendimiento: hasta 10 mg

Los kits QIAGEN Plasmid Plus ofrecen el método más práctico para la preparación de plásmidos a gran escala. El diseño y la química de unión única de las columnas QIAGEN Plasmid Plus permiten un procedimiento sencillo de unión, lavado y elución basado en una química innovadora. Este procedimiento convierte a estos kits en la preparación a gran escala más rápida disponible: 20 minutos para preparaciones maxi y midi. El ADN plasmídico resultante está altamente concentrado y listo para su uso inmediato en aplicaciones posteriores sin necesidad de precipitación con etanol. Por lo tanto, el ADN plasmídico es ideal para aplicaciones que solo permiten pequeños volúmenes de reacción.

Rendimiento máximo de plásmidos utilizando LyseBlue

LyseBlue, un indicador de color opcional que permite identificar visualmente la mezcla óptima del tampón, también se incluye en el kit. Esto evita errores comunes de manipulación que provocan una lisis celular ineficiente y una precipitación incompleta de SDS, ADN genómico y restos celulares. Mediante un simple cambio de color, este exclusivo aditivo para tampón garantiza una lisis celular y una neutralización óptimas, maximizando el rendimiento.

Procedimiento

Los cartuchos QIAfilter incluidos en los kits QIAGEN Plasmid Plus permiten una rápida clarificación del lisado. La carga del lisado clarificado en la columna se realiza en un solo paso, ahorrando tiempo. Se utiliza un colector de vacío (como el QIAvac 24 Plus) para extraer el lisado clarificado y los tampones de lavado subsiguientes a través de la columna QIAGEN Plasmid Plus. Tras el lavado y secado de la membrana, el ADN altamente concentrado se eluye en pequeños volúmenes mediante centrifugación (véase el diagrama de flujo "Procedimiento QIAGEN Plasmid Plus").

Aplicaciones

- Transfección en la mayoría de las líneas celulares (por ejemplo, líneas celulares sensibles como Huh-7)
- Digestión con restricción
- Clonación
- Transcripción y traducción in vitro
- Secuenciación

Los kits QIAGEN Plasmid Plus proporcionan ADN plasmídico de grado de transfección muy adecuado para todas las aplicaciones, como: