Qiagen, 13362, Kit Maxi de ADN para cultivo de células y sangre (10)

10 puntas genómicas QIAGEN 500/G, tampones de proteasa QIAGEN

Características

- Aislamiento confiable de ADN de alto peso molecular de hasta 150 kb de tamaño
- Sin extracciones con fenol o cloroformo
- Procesamiento paralelo y conveniente de múltiples muestras

Detalles del producto

Los kits de ADN para cultivo de sangre y células incluyen puntas de intercambio aniónico de flujo por gravedad y tampones para el aislamiento eficiente de ADN genómico de una amplia gama de muestras biológicas. El ADN purificado tiene un tamaño de hasta 150 kb, con un tamaño promedio de 50 a 100 kb.

Para las muestras de levaduras y bacterias es necesaria la compra del kit de tampón de ADN genómico (n.º de cat. 19060).

Actuación

El procedimiento QIAGEN Genomic-tip es muy suave y produce una fragmentación mínima del ADN. El ADN purificado con QIAGEN Genomic-tips alcanza un tamaño de hasta 150 kb, con una longitud promedio de 50-100 kb (véase la figura "ADN genómico de hasta 150 kb"). El ADN está libre de contaminantes como ARN, proteínas y metabolitos, y presenta una relación A₂₄/A₂₄ de entre 1,7 y 1,9.

El tamaño excepcionalmente grande del ADN obtenido lo hace especialmente adecuado para preparar bibliotecas de alta calidad para la secuenciación de próxima generación (NGS) en diferentes plataformas y es recomendado por varias instalaciones centrales.

Principio

Las puntas genómicas QIAGEN, incluidas en los kits de ADN para cultivos de sangre y células, utilizan la exclusiva tecnología de intercambio aniónico de QIAGEN para purificar ADN de alto peso molecular de una amplia gama de muestras biológicas sin fenol ni cloroformo. Los tampones de lisis están optimizados para diferentes tipos de muestras y proporcionan una desnaturalización inmediata de proteínas como nucleasas, histonas y proteínas de unión al ADN, así como de partículas virales potencialmente infecciosas. En las condiciones de pH y baja salinidad que proporciona el tampón, el ADN se une a la resina QIAGEN en la columna. Al mismo tiempo, otros componentes celulares, como proteínas, carbohidratos y metabolitos, fluyen a través de la columna. El ADN purificado se eluye en un tampón con alto contenido de sal. Las puntas genómicas funcionan por gravedad y pueden dejarse sin supervisión sin que se sequen. Esto reduce al mínimo el tiempo de manipulación y hace que el procedimiento sea ideal para el procesamiento simultáneo de múltiples muestras.

Procedimiento

Las muestras se lisan primero (las muestras de tejido se rompen mecánicamente) y simultáneamente se desnaturalizan las proteínas en el tampón de lisis adecuado (véase el diagrama de flujo "Procedimiento de QIAGEN Genomic-tip"). A continuación, se añade la proteasa o proteinasa K de QIAGEN y, tras un periodo de incubación adecuado, se cargan los lisados ​​en la QIAGEN Genomic-tip. El ADN se une a la columna mientras que otros componentes celulares pasan a través de ella. Tras un lavado para eliminar cualquier contaminante restante, el ADN puro de alto peso molecular se eluye y se precipita con isopropanol. El tiempo de intervención para el procedimiento completo es de tan solo 30 minutos para sangre y células cultivadas.

Los kits de ADN para cultivo de células y sangre son kits listos para usar que contienen todos los componentes necesarios para la purificación de ADN de alto peso molecular de sangre y células cultivadas.

Aplicaciones

- Sanger y secuenciación de próxima generación
- Secuenciación de lectura larga
- Análisis RFLP
- Análisis de la focalización genética
- Cribado de animales transgénicos
- Estudios de huellas dactilares de ADN
- Amplificación por PCR

El ADN purificado con los kits de ADN de cultivo de células y sangre es adecuado para su uso en las siguientes aplicaciones: