Qiagen, 151023, Kit de ADN mitocondrial REPLI-g (25)

ADN polimerasa, tampones y reactivos para 25 reacciones de amplificación de genoma completo específicas de ADN mitocondrial de 50 μl

Características

- Amplificación sensible a partir de diferentes tipos de muestras
- Adecuado para la amplificación de mtADN humano y no humano.
- Supera la necesidad de aislar el ADNmt, lo cual requiere mucho tiempo.
- Resultados informativos de muestras con ADN nuclear degradado
- Amplificación de ADN a partir de tarjetas de sangre y cabello.

Detalles del producto

El kit de ADN mitocondrial REPLI-g permite la amplificación selectiva del ADN mitocondrial a partir de muestras de ADN total, sin necesidad de aislarlo previamente. Este kit proporciona ADN polimerasa, tampones y reactivos para la amplificación específica y uniforme del genoma completo a partir de pequeñas muestras de ADN mitocondrial humano y no humano en muestras de ADN total. Para la amplificación de ADN mitocondrial no humano, es necesario sustituir la mezcla de cebadores REPLI-g Human mt por una mezcla de cebadores adecuada para esa especie (no incluida en el kit). El kit de ADN mitocondrial REPLI-g se basa en la tecnología de amplificación por desplazamiento múltiple (MDA), que enriquece el ADN mitocondrial con una mínima contaminación del ADN nuclear, evitando así el largo proceso de aislamiento del ADN mitocondrial y aumentando la sensibilidad de los ensayos posteriores.

Principio

Una limitación en el uso del ADN mitocondrial ha sido la necesidad de aislarlo del ADN nuclear, especialmente cuando se requiere aumentar la sensibilidad de los ensayos de marcadores de ADN mitocondrial. El procedimiento de aislamiento implica muchos pasos que requieren mucho tiempo y provoca pérdidas sustanciales de ADN mitocondrial. El kit de ADN mitocondrial REPLI-g supera esta limitación mediante el enriquecimiento de secuencias de ADN mitocondrial en muestras de ADN total.

La tecnología de ADN mitocondrial REPLI-g proporciona una amplificación de ADN rápida y altamente uniforme en todo el genoma mitocondrial. El método se basa en la tecnología de amplificación por desplazamiento múltiple (MDA), que realiza una amplificación genómica isotérmica utilizando una ADN polimerasa con una capacidad procesiva única. Gracias a su alta procesividad y actividad de desplazamiento de cadena, la ADN polimerasa REPLI-g puede amplificar hasta 100 kb sin disociarse del molde de ADN y minimiza la representación desigual de secuencias y locus en comparación con los métodos de amplificación basados ​​en PCR.

Aplicaciones

- Genotipado (p. ej., SNP, deleciones, inserciones)
- Endpoint-PCR, PCR cuantitativa en tiempo real
- Análisis de secuencias

El ADN mitocondrial amplificado por REPLI-g se puede utilizar en diversas aplicaciones posteriores, entre ellas: