Qiagen, 180244, Kit de microesferas de ARNm RNeasy Pure

Para 48 reacciones: perlas de ARNm puro, tampones, agua sin ARNasa, columnas de centrifugación pequeñas y tubos de recolección

Características

- Eliminación eficiente de casi todos los ARNr (significativamente >99%)
- Sin sesgo por eliminación involuntaria de ARNm poli A+
- Se requieren tan solo 100 ng – 5 μg de ARN total
- Máxima comodidad, mínimo tiempo de manipulación.
- Automatización en el QIAcube

Detalles del producto

El kit RNeasy Pure mRNA Bead permite la purificación altamente específica de ARNm basada en poliA-oligo-dT, lista para aplicaciones de secuenciación de nueva generación (NGS). Al depletar eficazmente el ARNr y el ARN no adenilado, no codificante y regulador de una amplia variedad de especies eucariotas, el kit enriquece el ARNm, garantizando un uso óptimo de la costosa capacidad y los recursos de secuenciación. Con un tiempo de preparación de <45 min y prácticas opciones de automatización, el kit RNeasy Pure mRNA Bead ofrece una comodidad inigualable al minimizar el tiempo de intervención para purificar el ARNm. El procedimiento se puede automatizar en QIAcube Connect.

El kit RNeasy Pure mRNA Bead, anteriormente conocido como kit GeneRead Pure mRNA, contiene una química idéntica.

Actuación

ARN ribosómico: eliminación (%)
28S: 99,99
18S: 99,99
5.8S: 99.99
5S: 99,99
16S metros: 99,09
12S metros: 99,78

Comodidad y rentabilidad excepcionales

El kit RNeasy Pure mRNA Bead contiene columnas de centrifugación y todos los reactivos y tampones necesarios para aislar ARNm poli A+ puro a partir de preparaciones de ARN total en menos de 45 minutos. La tecnología del kit RNeasy Pure mRNA Bead combina la cómoda manipulación de partículas magnéticas con la especificidad de la hibridación oligo-dT. Su protocolo optimizado solo requiere breves pasos de pretratamiento. Los productos de otros proveedores implican procedimientos más largos, ya que generalmente requieren una segunda ronda de purificación para lograr un ARNm lo suficientemente puro para aplicaciones NGS, lo que resulta en un aumento de recursos y costos. El kit RNeasy Pure mRNA Bead es el único kit del mercado que proporciona ARNm de máxima pureza con una sola ronda de purificación. El ARNm poli A+ purificado con la tecnología del kit RNeasy Pure mRNA Bead no requiere purificación adicional y está listo para su uso posterior en aplicaciones como NGS. Tras la purificación con el kit RNeasy Pure mRNA Bead, solo quedan lecturas significativas; la mayoría de estas lecturas son de ARNm poli A+.

Eliminación eficiente del ARN ribosómico

El kit RNeasy Pure mRNA Bead es el único kit de purificación de ARNm que elimina casi por completo el ARNr, incluido el ARNr mitocondrial (Figuras 1 y 2). El kit RNeasy Pure mRNA Bead supera a los kits de purificación de ARNm de otros proveedores y Enriquecimiento específico y eficiente de ARNm. Gracias al riguroso procedimiento del kit, se garantiza una alta pureza del ARNm para una mayor fiabilidad y reproducibilidad en aplicaciones posteriores sensibles, como la NGS. Además, solo se requieren pequeñas cantidades de material de partida, desde 5 μg hasta 100 ng.

Principio

La tecnología del kit RNeasy Pure mRNA Bead combina la cómoda manipulación de partículas magnéticas con la especificidad de la hibridación oligo-dT. Los protocolos requieren pasos de pretratamiento cortos. Las sondas oligo-dT se unen covalentemente a la superficie de las Pure mRNA Beads. El ARNm se une rápida y eficientemente a las sondas oligo-dT de las Pure mRNA Beads en presencia del tampón mRBB (véase la figura "Procedimiento práctico y optimizado"). El ARNm unido a las partículas magnéticas se lava posteriormente de forma eficiente. Se utilizan dos pasos de lavado para mejorar considerablemente la pureza del ARNm. El ARNm de alta pureza se eluye en el tampón de elución (tampón OEB) incluido en el kit. La producción de ARNm depende de la entrada y el almacenamiento de las muestras.

Procedimiento

El kit de microesferas de ARNm RNeasy Pure proporciona ARNm de máxima pureza con una sola ronda de purificación. El procedimiento completo dura menos de 45 minutos (véase la figura: Procedimiento práctico y optimizado).

Se requiere un tiempo mínimo de práctica

La mayor parte del procedimiento del kit RNeasy Pure mRNA Bead (desde la hibridación y la captura hasta la limpieza del ARN) se puede automatizar completamente en QIAcube, lo que ofrece máxima comodidad y mayor flexibilidad de procesamiento y minimiza el tiempo de intervención necesario.

Aplicaciones

- Secuenciación de próxima generación
- PCR cuantitativa en tiempo real
- Análisis de microarrays

El ARN preparado con el kit RNeasy Pure mRNA Bead es adecuado para su uso en una amplia gama de aplicaciones posteriores, como: