Qiagen, 19131, QIAGEN Proteinasa K (2 mL)

2 mL (>600 mAU/mL, solución)

Características

- Para la digestión con proteasas en procedimientos de aislamiento de ADN y ARN.
- Totalmente compatible con protocolos QIAGEN seleccionados
- Enzimas de calidad garantizada por QIAGEN

Detalles del producto

La proteasa y la proteinasa K de QIAGEN ofrecen una amplia especificidad de sustrato y una alta actividad en una amplia gama de condiciones de reacción. La proteinasa K de QIAGEN, en presentaciones de 2 y 10 ml, está diseñada para su uso en diversos kits de QIAGEN (consulte la lista en la sección "Principios" más adelante). Como expertos en preparación de muestras, QIAGEN también ofrece proteinasa K en polvo liofilizado (proteinasa K en polvo). Ambas proteasas ofrecen una alta actividad en los tampones utilizados habitualmente en la mayoría de los procedimientos de aislamiento de ADN y ARN, y cuentan con la garantía de calidad de QIAGEN.

Actuación

- No se detectó actividad de exonucleasa, endonucleasa o ARNasa.
- Solubilidad en agua ≥20 mg/mL; actividad ≥30 U/mg de liofilizado; actividad específica ≥40 U/mg de proteína; contenido proteico ≥70%; contenido de ADN ≤10 pg/mg
- Condiciones de envío: Temperatura ambiente

Proteasa QIAGEN y proteinasa K QIAGEN

La proteasa QIAGEN y la proteinasa K QIAGEN ofrecen una amplia especificidad de sustrato con alta actividad en tampones comúnmente utilizados en la mayoría de los procedimientos de aislamiento de ADN y ARN. Ambas enzimas cuentan con la garantía de calidad de QIAGEN.

La proteasa QIAGEN es particularmente estable y activa a pH alto. En tampones Tris de pH alcalino (7,5-10,5), la proteasa QIAGEN muestra una actividad específica entre un 30 % y un 40 % superior a la de la proteinasa K. En presencia de desnaturalizantes potentes, como la urea (urea 0,75-3 M) o el clorhidrato de guanidina (GuHCl 0,5-3,0), la actividad específica es comparable a la de la proteinasa K, siempre que la concentración de EDTA sea inferior a 8 mM. La proteasa QIAGEN muestra una mayor actividad en presencia de urea y clorhidrato de guanidina. Se obtiene una estimulación similar al añadir hasta un 1 % de SDS. La actividad enzimática también aumenta en función de la temperatura (30-55 °C). Para obtener más información, consulte la ficha técnica de la proteasa QIAGEN en la sección Recursos.

La enzima se inactiva fácilmente mediante incubación a 70 °C durante 15 minutos. La proteasa QIAGEN no se inhibe con EDTA de hasta 100 mM en tampones Tris·Cl. Sin embargo, en presencia de más del 1 % de SDS u otros desnaturalizantes potentes, la concentración de EDTA debe ser inferior a 8 mM.

Polvo de proteinasa K

El polvo de proteinasa K es un polvo blanco liofilizado, altamente activo, con una consistencia excepcional entre lotes (véase la figura «Alta consistencia entre lotes del polvo de proteinasa K»), lo que garantiza la reproducibilidad para condiciones de trabajo estables y resultados experimentales repetibles y fiables. El polvo de proteinasa K es altamente estable cuando se almacena a –20 °C (véase la figura «Estabilidad del polvo de proteinasa K»).

Especificaciones del polvo de proteinasa K:

Principio

Proteasa QIAGEN: Proteinasa K QIAGEN
Formato: Polvo liofilizado
Cantidad: 7,5 AU o 4 x 7,5 AU
Actividad: 45 mAU/mg de proteína
Definición de unidad: Un mAU es la actividad que libera aminoácidos y péptidos folin-positivos correspondientes a 1 µmol de tirosina por minuto.

- Kit de ácidos nucleicos circulantes QIAamp
- Minikit de ADN QIAamp
- Minikit de análisis de heces QIAamp Fast DNA
- Kit de sangre y tejido DNeasy
- Kit de sangre y tejido DNeasy 96
- Kit micro de ADN QIAamp
- Kit de medios QIAamp MinElute
- Kit QIAamp Media MDx

- Kits mini, midi y maxi de sangre de ADN QIAamp
- Kit de sangre de ADN QIAamp 96
- Kits de ADN para cultivo de células y sangre
- Kit QIAamp Virus BioRobot 9604
- Kit QIAamp DNA Blood BioRobot MDx
- Kit de virus DSP QIAamp
- Minikit de sangre de ADN DSP QIAamp

Especificaciones técnicas

La proteinasa K de QIAGEN (en envases de 2 y 10 ml) es una proteasa de tipo subtilisina aislada del hongo saprofito Tritirachium album y es especialmente adecuada para tiempos de digestión cortos. Posee una alta actividad específica que se mantiene estable en un amplio rango de temperaturas y valores de pH, con una actividad sustancialmente mayor a temperaturas más altas. El calcio soluble no es esencial para la actividad enzimática. Esto significa que el EDTA, utilizado para inhibir enzimas dependientes de Mg₂₄, como las nucleasas, no inhibe la actividad de la proteinasa K. La proteinasa K se suministra en los siguientes kits de QIAGEN:

La proteasa QIAGEN es una serina proteasa aislada de una cepa recombinante de Bacillus. Es una alternativa económica a la proteinasa K para el aislamiento de ADN y ARN nativos de diversas fuentes. La proteasa QIAGEN está completamente libre de actividad DNasa y ARNasa. Se suministra en los siguientes kits de QIAGEN:

Nota: Los usuarios de los kits de sangre de ADN QIAamp manuales y de los kits de ADN de cultivo de células y sangre QIAGEN deben resuspender cada botella de proteasa QIAGEN con 7 ml de agua destilada.

Nota: Los usuarios del kit QIAamp DNA Blood BioRobot 9604 deben resuspender cada botella de QIAGEN Protease con 10 mL de agua destilada.

Nota: La proteasa QIAGEN no es compatible con el tampón ATL en los kits DNeasy Tissue, DNeasy 96 Tissue y QIAamp DNA Mini. En presencia de >0,5 % de SDS, >1 % de sarcosilo o altas concentraciones de otros detergentes, la concentración de EDTA debe ser <8 mM para una actividad completa durante tiempos de incubación prolongados.

Procedimiento

Las instrucciones para el uso de QIAGEN Protease, QIAGEN Proteinase K y Proteinase K Powder se proporcionan en el manual del kit correspondiente.

Aplicaciones

La proteasa QIAGEN, la proteinasa K QIAGEN y el polvo de proteinasa K facilitan la digestión con proteasas durante la preparación de ADN y ARN. Al planificar las digestiones con proteasas, se deben considerar las sutiles diferencias entre las enzimas.