Qiagen, 205211, kit Sensiscript RT (50)

Para 50 reacciones de transcripción inversa: Sensiscript Reverse Transcriptase, 150 µl de tampón RT 10x, 100 µl de mezcla de dNTP (contiene 5 mM de cada dNTP), 1,1 ml de agua sin ARNasa

Características

- Detección sensible de tan solo 10 copias de plantilla
- Altos rendimientos de ADNc debido a la enzima de alta afinidad
- No se requiere ningún paso adicional de digestión con ARNasa H
- Procedimiento rápido y sencillo sin tediosos pasos de pipeteo.

Actuación

La transcriptasa inversa (RT) Sensiscript ofrece una eficiencia excepcional en un amplio rango dinámico y una alta sensibilidad para cantidades muy pequeñas de ARN (véase la figura "RT-PCR con ARN correspondiente a una célula"). Las regiones de ARN con alto contenido de GC pueden provocar que otras transcriptasas inversas se detengan, se disocien del molde de ARN o se salten las regiones de ARN con bucles (véase la figura "Productos de RT-PCR de longitud completa — B"). Sin embargo, estas plantillas complejas no suponen un problema para las transcriptasas inversas de QIAGEN (véase la figura "Productos de RT-PCR de longitud completa — A"). Sin necesidad de optimización, el kit Sensiscript RT permite una transcripción inversa prácticamente sin problemas.

La reproducibilidad entre lotes de los kits Sensiscript RT está garantizada por un riguroso control de calidad en QIAGEN. El tampón RT optimizado, los dNTP y el agua incluidos en todos los kits Sensiscript RT están garantizados libres de ARNasa, y cada lote de Sensiscript RT se somete a rigurosas pruebas de reproducibilidad por RT-PCR.

Principio

La transcriptasa inversa (RT) Sensiscript es la primera enzima disponible comercialmente diseñada para aplicaciones de alta sensibilidad con cantidades muy pequeñas de ARN (<50 ng), como la RT-PCR de células individuales o el análisis de biopsias pequeñas. Se suministra lista para usar con dNTP y en un tampón de reacción optimizado que, junto con la alta afinidad de Sensiscript RT por el ARN, permite una RT-PCR altamente específica y sensible, incluso con transcripciones de bajo número de copias, y la capacidad de leer incluso estructuras secundarias de ARN complejas sin ajustar la temperatura ni las condiciones de reacción. Tenga en cuenta que no se incluye la mezcla de cebadores.

Para el ARN viral, Omniscript RT suele ser la enzima elegida debido a la presencia de ARN transportador en la mayoría de las preparaciones de ARN viral.

Aplicaciones

- RT estándar y RT-PCR
- RT-PCR cuantitativa en tiempo real
- RT-PCR de visualización diferencial
- Extensión de cebadores y análisis RACE
- Síntesis de ADNc bicatenario para clonación

La transcriptasa inversa Sensiscript es adecuada para su uso en las siguientes aplicaciones: