Qiagen, 210220, Kit de solución Q

Solución Q 5x y MgCl2 25 mM para combinar con cualquier plantilla y realizar ensayos con cualquiera de las mezclas maestras QIAcuity

Características

- Mitiga la transferencia de inhibidores de PCR, como etanol, heparina y otros inhibidores potenciales.
- Ayuda en reacciones con plantillas de ácidos nucleicos con estructuras secundarias complejas.
- Mejora las reacciones con arrastre de quelantes de magnesio, como el EDTA.
- Compatible con kits e instrumentos QIAGEN para dPCR, PCR de punto final y qPCR

Detalles del producto

El kit Q-Solution se ha diseñado para optimizar las condiciones en reacciones complejas de qPCR y dPCR. El kit contiene 5 soluciones Q y 25 mM de MgCl₂, que pueden usarse solas o en combinación. Si es necesario, se puede ajustar el rango de concentración de ambas soluciones.

Actuación

Minimizar los efectos de los inhibidores de la PCR

Q-Solution es un aditivo de PCR innovador y versátil, compatible con cualquiera de las mezclas maestras QIAcuity. Las propiedades especiales de Q-Solution mitigan la acumulación de inhibidores, como alcohol residual, heparina, ácidos húmicos u otros agentes críticos que podrían afectar la reacción de PCR (Figura 1).

Aumentar la afinidad de unión del cebador

Si sospecha que una unión débil del cebador o de la sonda está generando un rendimiento deficiente de la PCR, intente agregar MgCl2 a su reacción de PCR.

Compatible con múltiples mezclas maestras de dPCR y qPCR

Pueden existir condiciones de PCR difíciles en cualquier reacción de dPCR, PCR de punto final o qPCR, lo que proporciona rendimiento, reproducibilidad y sensibilidad. Independientemente de su aplicación, los datos muestran que el kit Q-Solution puede mejorar las reacciones de dPCR, PCR de punto final y qPCR, en algunos casos después de una simple titulación de ambos componentes.

Principio

Al reducir la temperatura de fusión del ADN, Q-Solution puede superar las dificultades causadas por el ADN con alto contenido de GC o con estructuras secundarias complejas, como las presentes en los genomas de virus adenoasociados (AAV). El kit también mejora la eficiencia de la PCR en presencia de inhibidores. La adición de MgCl₂ es opcional y previene el fallo de la PCR causado por agentes quelantes como el EDTA. Como cofactor esencial de la ADN polimerasa, el MgCl₂ puede estabilizar las estructuras de ADN bicatenario, incluidas las formadas entre los cebadores y el molde. El principio de la reacción de dPCR en las nanoplacas se describe aquí.

Procedimiento

El protocolo es sencillo y puede llevarse a cabo en cualquier laboratorio con el sistema de PCR digital QIAcuity. Según las instrucciones del manual de usuario, el usuario puede preparar la mezcla de reacción como de costumbre y añadir Q-Solution y MgCl₂ como se describe en el Protocolo de Inicio Rápido. La mezcla se pipetea en la nanoplaca. Recomendamos titular Q-Solution y MgCl₂ antes del primer uso para encontrar la concentración óptima para la configuración de reacción específica.

Aplicaciones

El kit Q-Solution es ideal para diversas reacciones de dPCR en el QIAcuity, así como para PCR de punto final y qPCR. Para más ejemplos de aplicación, consulte nuestra Nota de Aplicación en la sección "Recursos".