Qiagen, 217061, Kit miRNeasy 96 (4)

Para preparaciones de 4 x 96: 4 placas RNeasy 96, microtubos de recolección (en gradilla), microtubos de elución CL, tapas, bloques S, hojas de cinta AirPore, reactivo de lisis QIAzol, reactivos y tampones sin ARNasa

Características

- Purificación eficaz de microARN (miARN) y ARN total, incluso de muestras pequeñas
- Enriquecimiento eficiente de miRNA y ARN <200 nucleótidos
- Protocolos para copurificación o aislamiento de fracciones separadas
- ARN de alta pureza adecuado para todas las aplicaciones posteriores
- Protocolos automatizables y procesamiento de alto rendimiento en formato de 96 pocillos

Detalles del producto

Los kits miRNeasy permiten la purificación de ARN total de todo tipo de tejidos y células animales, incluyendo tejidos difíciles de lisar y muestras pequeñas de tejido y células. Como alternativa, se puede purificar por separado una fracción enriquecida con miARN y una fracción de ARN total (>200 nt) (para una purificación por separado, se requiere un kit de limpieza RNeasy MinElute si se utiliza el kit miRNeasy Micro o Mini, y una placa RNeasy 96 adicional si se utiliza el kit miRNeasy 96). La purificación de 1 a 12 muestras se puede automatizar en QIAcube Connect. El procesamiento de alto rendimiento en un práctico formato de 96 pocillos se puede realizar mediante centrifugación o vacío.

El NUEVO minikit avanzado miRNeasy para tejidos y células: obtenga excelentes resultados más rápido sin fenol ni cloroformo gracias a nuestra química avanzada sin QIAzol. Pruébelo hoy mismo.

Actuación

La purificación de microARN basada en QIAzol (purificación de miARN) con los kits miRNeasy purifica eficientemente el ARN de muestras pequeñas de tejido (hasta 5 mg de tejido) y células (hasta 1 x 10⁻¹ células) (véase la figura "Recuperación alta y reproducible de miARN a partir de un número pequeño de células"). El ARN se puede purificar de diversos tejidos y células, incluidos los de difícil lisis.

La purificación del ARN total, incluyendo miARN, permite la comparación directa de los niveles de expresión de miARN con los de los genes de referencia constitutivos o cualquier otro ARNm de interés. Como alternativa, para algunas aplicaciones posteriores sensibles, puede requerirse una fracción enriquecida con miARN sin ARN de mayor tamaño. Los kits miRNeasy permiten un enriquecimiento eficiente de ARN de hasta aproximadamente 18 nt. La presencia de ARN muy pequeños es claramente visible tras la purificación con un kit miRNeasy, a diferencia de las muestras preparadas con un kit alternativo (véase la figura "Enriquecimiento efectivo de ARN pequeño"). Los kits miRNeasy purifican eficientemente el ARN de tejidos y células, incluso con pequeñas cantidades de material de partida (véase la figura "Purificación efectiva a partir de un rango de cantidades de partida").

El ARN se puede purificar con los kits miRNeasy a partir de diversos tejidos y células, incluyendo tejidos difíciles de lisar (véase la figura "Copurificación eficiente a partir de una amplia gama de tejidos"). Los procedimientos miRNeasy eliminan la posibilidad de contaminación con sales o fenol que podrían interferir con análisis posteriores (véase la figura "ARN de alta pureza sin arrastre de fenol"). Además de una mayor pureza, los kits miRNeasy ofrecen un rendimiento superior al de otros métodos de purificación de miARN, como el reactivo TRIzol (véase la figura "El minikit miRNeasy supera al TRIzol").

El ARN preparado utilizando los kits miRNeasy es altamente puro y está listo para usarse en aplicaciones posteriores sensibles.

Principio

Los kits miRNeasy combinan la lisis de muestras con fenol/guanidina con la purificación del ARN total mediante membrana de sílice. El reactivo de lisis QIAzol, incluido en los kits, es una solución monofásica de fenol y tiocianato de guanidina, diseñada para facilitar la lisis de tejidos, inhibir las ARNasas y eliminar la mayor parte del ADN celular y las proteínas del lisado mediante extracción orgánica.

Los kits miRNeasy Micro y Mini se pueden automatizar en QIAcube Connect. El kit miRNeasy 96 permite el procesamiento al vacío o por centrifugación.

Procedimiento

Los kits miRNeasy permiten la purificación de ARN total, que incluye ARN de aproximadamente 18 nucleótidos (nt) en adelante. Como alternativa, se puede purificar por separado una fracción enriquecida con miRNA y una fracción de ARN total (>200 nt) (véase el diagrama de flujo "Procedimientos miRNeasy"). El ARN total, incluyendo miRNA, es muy adecuado para su uso en la cuantificación de miRNA mediante RT-PCR en tiempo real. El enriquecimiento de ARN pequeños en una fracción separada puede ser ventajoso en ciertas aplicaciones donde el ARNm y el ARNr podrían generar un aumento del fondo. Este protocolo especializado requiere el uso del kit de limpieza RNeasy MinElute con el kit miRNeasy Micro o Mini. Si se utiliza el kit miRNeasy 96, se requieren 2 placas RNeasy 96 por cada 96 muestras.

Purificación automatizada de miRNA en QIAcube Connect

La purificación de ARN total, incluyendo miARN, de la fase acuosa tras la separación de fases se puede automatizar completamente en el QIAcube Connect utilizando el kit miRNeasy Micro o Mini (véase la figura "Recuperación alta y reproducible de miARN a partir de un número reducido de células"). El innovador QIAcube Connect utiliza tecnología avanzada para procesar las columnas de centrifugación QIAGEN, lo que permite una integración fluida de la preparación automatizada de muestras de bajo rendimiento en el flujo de trabajo de su laboratorio. La preparación de muestras con el QIAcube Connect sigue los mismos pasos que el procedimiento manual (es decir, lisar, unir, lavar y eluir), lo que le permite seguir utilizando el kit miRNeasy Micro o Mini para la purificación de ARN de alta calidad.

Aplicaciones

- Secuenciación de ARN
- RT-PCR cuantitativa en tiempo real (por ejemplo, utilizando el sistema de PCR miScript)
- Análisis de transferencia Northern
- Análisis de microarrays

Los kits miRNeasy permiten la purificación de miRNA con ARN total para su uso en una variedad de aplicaciones, que incluyen: